[发明专利]含有包含蛋白G的细胞膜外结构域变体的串联型多聚体的蛋白质的捕获剂在审
| 申请号: | 201380041180.1 | 申请日: | 2013-07-29 |
| 公开(公告)号: | CN104540853A | 公开(公告)日: | 2015-04-22 |
| 发明(设计)人: | 本田真也;渡边秀树;吉田昼也;上田桃子;中井康人;矶部丰 | 申请(专利权)人: | 独立行政法人产业技术综合研究所;株式会社大赛璐 |
| 主分类号: | C07K17/00 | 分类号: | C07K17/00;C07K14/315;C07K19/00;C07K1/14;C07K1/22;C12N15/09 |
| 代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 李英 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 含有 包含 蛋白 细胞膜 结构 变体 串联 型多聚体 蛋白质 捕获 | ||
1.针对具有抗体、免疫球蛋白G或免疫球蛋白G的Fc区域的蛋白质的捕获剂,其是将包含针对具有免疫球蛋白G的Fc区域的蛋白质有结合活性的细胞膜外结构域突变体的串联型多聚体的蛋白质主要经由氨基固定到水不溶性固相支持体而成。
2.权利要求1所述的捕获剂,其是将包含针对具有免疫球蛋白G的Fc区域的蛋白质有结合活性的细胞膜外结构域突变体的串联型多聚体的蛋白质固定到水不溶性固相支持体而成的、针对具有抗体、免疫球蛋白G或免疫球蛋白G的Fc区域的蛋白质的捕获剂,其静态抗体吸附容量(SBC)是40(mg-人IgG/ml-gel)以上。
3.权利要求2所述的捕获剂,其中静态抗体吸附容量(SBC)是44(mg-人IgG/ml-gel)以上。
4.权利要求1~3中任一项所述的捕获剂,其中串联型多聚体是串联型三聚体。
5.权利要求1~4中任一项所述的捕获剂,其中构成多聚体的细胞膜外结构域突变体彼此相同。
6.权利要求1~5中任一项所述的捕获剂,其中各细胞膜外结构域突变体经由接头序列连结。
7.权利要求1~6中任一项所述的捕获剂,其中针对具有免疫球蛋白G的Fc区域的蛋白质有结合活性的细胞膜外结构域是链球菌(Streptococcus)属链球菌的蛋白G的B1、B2或者B3中的任何一个。
8.权利要求1~7中任一项所述的捕获剂,其中所述蛋白质对免疫球蛋白G的Fc区域有结合活性、且与由野生型蛋白G·B结构域的串联型多聚体组成的蛋白质相比,至少其针对免疫球蛋白G的Fab区域的结合活性和/或针对Fc区域在弱酸性区域的结合活性降低。
9.权利要求1~8中任一项所述的捕获剂,其中构成多聚体的至少一个细胞膜外结构域突变体是以下的突变体蛋白质:
野生型蛋白G·B1结构域蛋白质的突变体蛋白质,由以下的(a)所示的氨基酸序列组成,或由在(a)所示的氨基酸序列中,缺失、取代、插入或附加1个或数个氨基酸残基的氨基酸序列组成,其针对免疫球蛋白G的Fc区域有结合活性、且与野生型蛋白G·B1结构域蛋白质相比,至少其针对免疫球蛋白G的Fab区域的结合活性和/或对Fc区域在弱酸性区域的结合活性降低:
(a)AspThrTyrLysLeuIleLeuAsnGlyLysX11LeuLysGlyGluThrX17Thr GluAlaValX22AlaAlaX25AlaGluLysValPheLysX32TyrAlaX35X36X37Gly ValX40GlyX42TrpThrTyrAspX47X48ThrLysThrPheThrValThrGlu
(上述氨基酸序列中,X35表示Asn或Lys,X36表示Asp或Glu,X37表示Asn、His、或者Leu,X47表示Asp或Pro,X48表示Ala、Lys或Glu,X22表示Asp或His,X25表示Thr或His,X32表示Gln或His,X40表示Asp或His,X42表示Glu或His,X11表示Thr或Arg,X17表示Thr或Ile;不过,同时X35是Asn或Lys、X36是Asp或Glu、X37是Asn或Leu、X47是Asp或Pro、X48是Ala、Lys或Glu、X22是Asp、X25是Thr、X32是Gln、X40是Asp、X42是Glu、X11是Thr,并且排除X17是Thr的情况)。
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