[发明专利]生物靶标与固相酰脲的选择性结合有效
申请号: | 201380038205.2 | 申请日: | 2013-05-30 |
公开(公告)号: | CN104619388A | 公开(公告)日: | 2015-05-13 |
发明(设计)人: | 彼得·加尼翁 | 申请(专利权)人: | 新加坡科技研究局 |
主分类号: | B01D15/00 | 分类号: | B01D15/00;C12N7/02;G01N33/48 |
代理公司: | 北京英赛嘉华知识产权代理有限责任公司 11204 | 代理人: | 王达佐;洪欣 |
地址: | 新*** | 国省代码: | 新加坡;SG |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 靶标 固相酰脲 选择性 结合 | ||
1.从样品选择性地分离生物靶标的方法,所述样品包含生物靶标材料或疑似包含所述生物靶标,所述方法包括下述步骤:(i)提供在其表面处包含酰脲部分的固体;(ii)使所述样品与所述固体接触,由此使所述样品中的大部分生物靶标结合所述酰脲部分;和(iii)将所述固体与所述样品分离。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述生物靶标具有在选自以下的范围内的大小:(1)约10nm至约200nm,(2)约200nm至约1微米,(3)约1微米至约20微米,和(4)约20微米或更大。
3.根据权利要求1所述的方法,其中所述生物靶标是具有在以下范围内的分子量的大生物靶标:(1)约100千道尔顿至约500千道尔顿,(2)约500千道尔顿至约100万道尔顿,(3)约100万道尔顿至约1000万道尔顿,和(4)约1000万道尔顿或更大。
4.根据权利要求1所述的方法,其中所述生物靶标是细胞。
5.根据权利要求4所述的方法,其中所述细胞包含选自以下的一种:(i)哺乳动物细胞,(ii)昆虫细胞,(iii)酵母细胞,(iv)细菌细胞和(v)另一种生物细胞。
6.根据权利要求1-5所述的方法,其中所述生物靶标包含细胞的亚结构。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述细胞的亚结构包含选自以下的一种:(i)细胞器,(ii)包涵体,(iii)内毒素,或(iv)另一种细胞的亚结构。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述细胞的亚结构包含选自以下的细胞器:(i)外泌体,(ii)核糖体,(iii)线粒体,(iv)叶绿体,或(v)另一种细胞的亚结构。
9.根据权利要求1-8所述的方法,其中至少50%的所述生物靶标结合所述酰脲部分。
10.根据权利要求9所述的方法,其中至少75%的所述生物靶标结合所述酰脲部分。
11.根据权利要求9所述的方法,其中至少90%的所述生物靶标结合所述酰脲部分。
12.根据权利要求9所述的方法,其中至少95%的所述生物靶标结合所述酰脲部分。
13.根据权利要求9所述的方法,其中至少99%的所述生物靶标结合所述酰脲部分。
14.根据权利要求1-13所述的方法,其中基本上所有的所述生物靶标结合所述酰脲部分。
15.根据权利要求1-14所述的方法,其中所述酰脲部分存在于尿囊素上。
16.根据权利要求1-15所述的方法,其中所述酰脲部分是结晶性的,且所述固体呈粉末形式。
17.根据权利要求15所述的方法,其中所述尿囊素是在水性液体中,且通过以过饱和浓度存在而呈固体。
18.根据权利要求15所述的方法,其中所述尿囊素是在水性液体中,且所述尿囊素处于由以下之一组成的浓度:(i)大于0.56%、(ii)0.56-20%、(iii)5-10%、(iv)1-2%、(v)2-5%、(vi)20-50%。
19.根据权利要求1所述的方法,其中通过过滤或沉降,将与所述固体结合的生物靶标与所述样品分离。
20.根据权利要求19所述的方法,其中如下洗涤所述生物靶标:将它重新悬浮于清洁缓冲液中,然后通过沉降或过滤回收所述固体。
21.根据权利要求20所述的方法,其中所述酰脲是过饱和的尿囊素,且所述清洁缓冲液包含处于饱和或接近饱和的尿囊素。
22.根据权利要求20和21所述的方法,其中洗涤步骤可以重复一次或多次。
23.根据权利要求19-22所述的方法,其中所述酰脲部分体现在尿囊素中,且通过溶解所述尿囊素的至少一些,将所述生物靶标与所述尿囊素的至少一些分离。
24.根据权利要求23所述的方法,其中随后通过渗滤来浓缩所述生物靶标。
25.根据权利要求24所述的方法,其中再溶解所述生物靶标是与渗滤同时的。
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