[发明专利]多价脑膜炎球菌缀合物及制备缀合物的方法

说明书

本文公开了可引起针对来自组A、C、W‑135和Y的脑膜炎球菌多糖(PS)和组B因子H结合蛋白(fHbp)的免疫应答的脑膜炎球菌免疫原性缀合物。所述公开的缀合物还表现出针对脑膜炎球菌A、C、W‑135、Y、B和X血清组的杀菌活性。还公开了改进的制备缀合物——例如免疫原性缀合物——的方法，包括在约4℃下用氰基化试剂活化多糖。

相关申请的交叉引用

本发明要求2012年5月24日提交的美国临时申请No.61/651,382的优先权，所述申请以引用的方式全文纳入本文。

技术领域

本公开内容涉及缀合物，具体为免疫原性脑膜炎球菌缀合物，以及制备所述缀合物的方法。

背景技术

在13个分离的脑膜炎球菌血清组中，A、B、C、W-135和Y是最普遍的。现有三种FDA批准的基于荚膜多糖(PS)的疫苗——四价PS疫苗(Sanofi Pasteur)、(Sanofi Pasteur)和(Novartis)四价缀合疫苗，用于针对由组A、C、W-135和Y脑膜炎奈瑟氏球菌引起的脑膜炎球菌疾病进行保护。组B荚膜PS——具有α2→8糖苷键的多聚唾液酸——与某些人组织中表达的PS结构相似(Finne et al.，Lancet2：355-357，1983)，从而使其成为较差的免疫原。另外，如果用作疫苗，存在其诱导自身免疫应答的可能性。因此，需要开发其他脑膜炎球菌疫苗，特别是针对组B和组X脑膜炎球菌血清组。

发明内容

本文公开了免疫原性缀合物，所述免疫原性缀合物包括至少一种缀合至奈瑟氏球菌表面蛋白(例如组B因子H结合蛋白(fHbp)或奈瑟氏球菌表面蛋白A(NspA))的多糖或蛋白质。在一些实例中，所述缀合物是脑膜炎球菌的免疫原性缀合物，所述缀合物可引起针对来自组A、C、W-135和Y的脑膜炎球菌多糖(PS)的免疫应答。在其他实例中，所述免疫原性缀合物也可引起针对fHbp或NspA的免疫应答。在其他实例中，所公开的缀合物还表现出针对脑膜炎球菌A、C、W-135、Y、B和X血清组的杀菌活性。在一些实例中，所述免疫原性缀合物是多价免疫原性缀合物。

还公开了改进的制备缀合物——包括这类免疫原性缀合物——的方法。在一些实施方案中，所述方法包括将至少一种第一部分(例如PS、蛋白质、药物或其他化合物)与氰基化试剂(cyanylation agent)在约2℃至约6℃下反应，形成氰酸酯-活化的第一部分，并将所述氰酸酯-活化的第一部分与具有至少一个氨基基团或至少一个酰肼基团(例如酰肼-活化的第二部分)的第二部分(例如PS、蛋白质、药物或其他化合物)在约2℃至约6℃接触，得到包括至少一个在至少一个第一部分和至少一个第二部分之间形成的C-N键的缀合物。

在一些非限制性实施方案中，所述方法包括使至少一种多糖与氰基化试剂在约2℃至约6℃反应，形成氰酸酯-活化的多糖，并将所述氰酸酯-活化的多糖与至少一种蛋白质(例如fHbp或NspA)接触，得到包括至少一个在所述至少一种多糖和所述至少一种蛋白质之间形成的C-N键的免疫原性缀合物。在一些实例中，本方法也包括将所述至少一种蛋白质与肼、羰酰肼、盐酸肼(hydrazine chloride)、二酰肼或其混合物在约2℃至约6℃反应，形成至少一种酰肼-活化的蛋白质溶液，并将所述至少一种氰酸酯-活化的多糖与至少一种蛋白质在约2℃至约6℃接触，使所述至少一种氰酸酯-活化的多糖与所述至少一种酰肼-活化的蛋白质反应，得到包括至少一个在所述至少一种多糖和所述至少一种蛋白质之间形成的C-N键的免疫原性缀合物。

从参照附图进行的以下详细描述中，所述公开内容的上述和其他特征会变得更加清楚。

附图说明