[发明专利]用于具有原位校准的凝胶电泳的组合物和方法

权利要求书

1.一种用于进行具有原位校准的电泳的方法，所述方法包括：

将一定体积的测试样品与一定体积的校准样品结合以形成最终体积，其中，所述体积的校准样品包括已知浓度的校准物并且所述最终体积是测试样品和校准样品的已知的结合体积；

在电泳凝胶的接收孔中沉积上样部分，其中，所述上样部分是所述最终体积的一部分；

沿着所述电泳凝胶的共用分离泳道分离所述上样部分使得所述测试样品的组分和校准物沿着所述共用分离泳道彼此分开，其中，所述测试样品的组分和所述校准物各自结合到能产生或引起可检测信号产生的信号产生分子，以及其中，所述测试样品的组分和所述校准物结合至彼此可区别的信号产生分子；

在所述共用分离泳道内检测所述校准物和测试样品的分离组分；并且

基于所述检测测量所述校准物和所述测试样品的分离组分的水平，从而进行具有原位校准的电泳。

2.根据权利要求1所述的方法，进一步包括：

基于所述校准物的测定水平、所述测试样品的分离组分的测定水平、和测试样品与校准样品的已知体积比，计算所述最终体积中的所述测试样品的组分的浓度。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述方法进一步包括：使所述测试样品的分离组分和/或校准物与能够与所述信号产生分子相互作用的试剂接触，其中，在与所述试剂接触后所述信号产生分子产生可检测的信号，并且其中，所述检测包括检测所述可检测的信号。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述测试样品的组分包含至少两种不同的组分。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，至少两种组分中的每一种结合至能产生或引起不同的可检测信号产生的信号产生分子，每种所述可检测信号是彼此可区别的。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述可检测的信号是通过辐射测量、比色测量、发光测量、或荧光测量方法可检测的。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述测试样品中的一种或多种组分包括脂蛋白颗粒或其部分，并且其中，所述检测包括检测所述脂蛋白颗粒或其部分。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述脂蛋白颗粒或其部分选自由以下组成的组：载脂蛋白A、载脂蛋白B、载脂蛋白C、载脂蛋白D、载脂蛋白E、载脂蛋白H、脂蛋白a、高密度脂蛋白、中等密度脂蛋白、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、乳糜微粒、它们的氧化变体和混合物。

9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述沉积是用电泳梳进行。

10.根据权利要求1所述的方法，其中，所述校准物是荧光团。

11.根据权利要求1所述的方法，其中，所述校准物包括蛋白质。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述校准物包括白蛋白。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述白蛋白偶联至信号产生分子。

14.根据权利要求12所述的方法，其中，所述白蛋白偶联至荧光团。

15.根据权利要求1所述的方法，其中，在凝胶电泳期间，所述校准物以比所述测试样品的组分更快的速度在电泳凝胶上迁移。

16.根据权利要求7所述的方法，其中，在凝胶电泳期间，所述校准物以比脂蛋白颗粒更快的速度在电泳凝胶上迁移。

17.根据权利要求1所述的方法，其中，所述测试样品是生物样品。

18.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述检测之前，固定所述校准物和所述分离组分。

19.根据权利要求18所述的方法，其中，通过免疫固定技术固定所述校准物和分离组分，所述免疫固定技术包括：

使所述校准物和分离组分与包含第一抗体或其片段和第二抗体或其片段的抗血清接触，使得所述第一抗体或其片段结合所述校准物以及所述第二抗体或其片段结合所述分离组分；并且

清洗所述电泳凝胶以除去所述凝胶中未结合的物质。

20.根据权利要求1所述的方法，其中，所述校准物包括结合至荧光团的蛋白或多肽。

21.根据权利要求8所述的方法，其中，所述低密度脂蛋白为脂蛋白X。