[发明专利]用于在自动分析仪上光度测定流体样品中的分析物的多应用方法

说明书

本发明涉及用于通过光度测定法测定可以显示干扰的样品的特定分析物的量的方法，其中所述特定分析物从所述分析物与分析物特异性测定试剂相互作用后反应混合物的光信号变化来定量。对于待测定的样品的特定分析物，对于多个波长生成多条校准曲线，将测量结果储存在仪器平台的数据管理系统中。同时进行干扰测试以测定特定分析物，用于定量待测定样品中存在的干扰物质的量。将各干扰物质的量与预定截止值进行比较。在完整反应时间在多个波长测量反应混合物中待测定的样品的特定分析物的光信号，且根据干扰物质选择校准曲线。最终，通过与所选波长的所选校准曲线比较来定量待测定的样品的特定分析物的量。

发明领域

本发明涉及用于通过光度测定法测定可以显示干扰的样品的特定分析物的量的方法，其中所述特定分析物从所述分析物与分析物特异性测定试剂相互作用后反应混合物的光信号变化来定量。对于待测定样品的特定分析物，对于多个波长生成多条校准曲线，将测量结果储存在仪器平台的数据管理系统中。同时进行干扰测试以测定特定分析物，用于定量待测定样品中存在的干扰物质的量。将各干扰物质的量与预定截止值进行比较。在完整反应时间在多个波长测量反应混合物中待测定样品的特定分析物的光信号，且根据干扰物质选择校准曲线。最终，通过与所选波长的所选校准曲线比较来定量待测定样品的特定分析物的量。

用于光度测定流体中的分析物的诊断测定法，包括浊度(turbidimetric)、比浊(nephelometric)和比色(colorimetric)测定法，是常见且众所周知的。由于其容易的一步程序和其短周转时间，此类测定法是用于在自动分析仪中应用的理想候选。如今，高度自动化的分光光度分析仪用于临床诊断中以便以时间和成本有效的方式进行光度测定法。分析仪上的工作流程的特征在于简单的程序，而没有任何分离或洗涤步骤，通常涉及以下方案：a) 将含有未知量分析物的样品(血清或血浆)和分析物特异性测定试剂分配至反应杯中，b) 在杯中，使样品和试剂在规定温度孵育特定时间段，c) 光度计测量与所述样品中分析物的量相关的所述杯中测定溶液的光信号。

对于临床化学分析仪例如Roche Diagnostics cobas® c提供基于浊度、比浊或比色测定法的广泛测试菜单。在cobas® c仪器上检测这些测定法基于具有卤钨灯作为照射源、用于生成单色光的光栅和光电二极管阵列 (产生340和800 nm之间的12个波长的12个二极管)作为检测器的光度计。

经常将关键样品提交用于在临床实验室进行常规生化测试，其显示对应用的测定法的干扰，因此导致改变和错误的结果。当用使用光学方法如比色和浊度方法的实验室测试进行工作时，样品基质中显色或散射光的物质通常引起干扰。此类干扰物质的实例是血红蛋白(溶血)、胆红素(黄疸)和脂质(脂血)，其在通常用于分光光度测试的波长吸收或散射光。

溶血是一个重要的干扰因素，这通常归因于不同因素对红细胞的体外破坏，诸如分离血清或血浆前血液的长期储存、通过迅速迫使血液经过小针头的剪切力、混合时的过度搅拌或血清的离心和分离的物理作用。体内溶血发生频率较低，但它对实验室测试具有相同的效果。溶血干扰检测程序的机制是由释放的血红蛋白的颜色干扰，尽管还有从受损的红细胞泄漏分析物和红细胞组分与分析物之间的化学相互作用也是可能的原因。作为结果，由于血红蛋白干扰，在临床试验中可以获得错误地更高或错误地更低的分析物浓度。其他血细胞如白细胞和血小板的组分也可以污染样品。例如，细胞衰变可以导致白血病患者的血液变化；血小板在凝血过程中的衰变导致血清中较高浓度的细胞内血小板成分。