[发明专利]植物作为功能microRNA和/或功能siRNA运载体、制备方法及其应用

说明书

本发明涉及植物作为功能microRNA和/或功能siRNA运载体、制备方法及其应用。具体地，本发明公开了以植物或其可食用部分或其提取物作为功能microRNA和/或功能siRNA的运载体及其用途。还公开了一种运载功能microRNA和/或功能siRNA的方法，包括步骤：将植物植株或其可食用部分或其提取物口服施用于需要的对象，其中，所述的植物或其可食用部分表达并携带功能microRNA和/或功能siRNA运载体，并且所述的提取物含有所述的功能microRNA和/或功能siRNA。

技术领域

本发明涉及生物领域。具体地，本发明涉及将植物作为功能microRNA和/或功能小干扰核糖核酸(siRNA)的运载体、及所述运载体的制备方法和应用。

背景技术

小干扰核糖核酸(siRNA)是一类由20多个核苷酸组成的双链RNA分子，可以通过特异性降解靶基因的信使核糖核酸(messenger RNA，mRNA)起到沉默基因表达的作用，这一过程被称为RNA干扰(RNA interference，RNAi)，在基因调控和生长发育等方面发挥着重要作用。RNA干扰(RNAi)是一种抗病毒机制。它是由dsRNA介导的序列特异性的同源基因的转录后的基因沉默，在细胞内有效作用方式为siRNA。RNA干扰可以利用siRNA或siRNA表达载体特异地沉默靶基因，此方式快速、经济、简便，且具有高度的序列专一性，可以获得功能丧失或减低突变序列特异方式剔除目的基因表达，成为探索基因功能的重要研究手段。由于RNAi可以特异地下调特定基因的表达和复制，已在抗病毒及肿瘤研究方面获得了许多进展。在利用RNA干扰技术对HIV-1、乙型肝炎、丙型肝炎等进行基因治疗研究中发现，选择病毒基因组中与人类基因组无同源性的序列作为抑制序列可在抑制病毒复制的同时避免对正常组织的毒副作用。同时将抑制序列选择在特定的位点，可对部分有明确基因突变的恶性肿瘤细胞产生凋亡诱导作用。此外尚可通过使用肿瘤特异性启动子，引导针对某些癌基因或凋亡分子的siRNA表达，从而达到特异性杀伤肿瘤细胞的目的。

小干扰核糖核酸(siRNA)，可以通过人工设计siRNA序列，更有针对性的抑制靶基因发挥作用而被广泛应用到基因调控中。虽然RNA干扰已广泛应用于生物医学研究各个方面，但目前该技术仍有一些难以解决的问题。其中，递送siRNA的稳定性差、效率低是妨碍其应用的主要原因。研究表明，小RNA家族中人工合成的siRNA一般很不稳定，易被循环系统中的RNA酶降解，更加不能耐受消化道的酸、碱环境。例如血清中的RNAse A类RNA酶导致siRNA的降解(Haupenthal等，Inhibition of RNAse A family enzymes prevents degradationand loss of silencing activity of siRNAs in serum)，因此，抑制血清中RNAse A可阻止siRNA的降解和沉默效果的减弱。该研究还指出，siRNA的降解与其序列紧密相关。因此在应用siRNA时，为抵抗RNA酶的降解会尝试多种措施(包括化学修饰、脂质体包裹等)。