[发明专利]具有至少一个可移除区段的电泳凝胶盒有效
申请号: | 201380028133.3 | 申请日: | 2013-05-31 |
公开(公告)号: | CN104335034B | 公开(公告)日: | 2017-06-09 |
发明(设计)人: | L.比约克斯滕;O.萨尔文;C.拉森;E.J.布尔内尔德;S.埃德伦;H.奥斯特林;S.肖兰德;K.斯特里斯伯格-弗里登;O.罗恩;P.奥利维尤森;H.比约克曼 | 申请(专利权)人: | 通用电气健康护理生物科学股份公司 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司72001 | 代理人: | 李强,周心志 |
地址: | 瑞典乌*** | 国省代码: | 暂无信息 |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 至少 一个 区段 电泳 凝胶 | ||
技术领域
本发明涉及用于电泳实验的电泳凝胶盒,并且更特别地,涉及具有改进的操作性的电泳凝胶盒。
背景技术
电泳是常用于分析的方法,其中,带电荷的分子和微粒在分离介质(通常是凝胶)中迁移,分离介质在两个电极之间经受电场。可用等电点(pI)、分子量、电荷或这些因素的组合来使蛋白质分离。
分离凝胶通常置于支承件上,并且凝胶的两个相对的端部接触呈溶液形式或刚性形式的电极缓冲剂。电极可插入包含电极缓冲剂的容器中。来自电解介质和离子储存器的缓冲溶液使pH值和其它参数保持恒定。在分离之后,用不同的方式检测和识别分子:例如通过对凝胶着色直观地检测和识别,或者用光学手段,诸如用激光扫描仪等扫描经着色的凝胶或带标记样本,或者对它们成像。
凝胶电泳如今在常规上用来分离生物分子,诸如蛋白质、缩氨酸、核酸等。在不同类型的筛选、识别(细胞信号转导、表达&净化)或临床试验中操作样本。蛋白质样本可源自例如人体、哺乳动物组织、细胞溶菌或细菌、昆虫或酵母细胞系统。不同类型的分子的电泳条件是不同的,而且必须适应许多情况。因而,通常必须针对各个类型的样本来选择凝胶和缓冲溶液两者。
电泳过程的准备包括几个非常费力的步骤。选择适当的凝胶,并且将其置于或模制在支承件上。凝胶与缓冲溶液接触。常用方式是使玻璃盒或塑料盒中的凝胶厚片接触缓冲剂罐中的缓冲溶液。对于各次运行,凝胶必须置于支承件或准备好的盒上。然后对缓冲剂罐填充缓冲溶液,并且将样本施用到凝胶上。为了避免对缓冲剂罐中的缓冲溶液的操作,已经在WO 87/04948中提议,在凝胶材料中结合缓冲剂物质,由此获得呈缓冲剂条的形式的缓冲剂。另外,US 6368481公开了一种预浇铸电泳盒,其中,结合缓冲剂条作为盒的组成部分。
在电泳分离之后,以及为了检测给定样本中的特定蛋白质,可将蛋白质转移到膜片(典型地硝化纤维或PVDF),其中使用对目标蛋白质专有的抗体来探测(检测)它们,这是通常被称为蛋白质印迹或免疫印迹的过程。将蛋白质转移到膜片的主要方法被称为电印迹,并且使用电流来将蛋白质从凝胶拉到膜片中。蛋白质从凝胶内移动到膜片上,同时保持它们在凝胶内所具有的组织结构,由此蛋白质暴露在薄表层上供检测。蛋白质由于膜片的非专有的蛋白质结合属性(即,同样良好地结合所有蛋白质)而结合到膜片的表面上。为了避免不明确地结合探测抗体,可挡住膜片上的其余结合位点。
在探测(检测)过程期间,膜片与转移蛋白质一起被针对关注的蛋白质的特定的第一抗体和例如关注的蛋白质的第二抗体(其具有与报告酶关联的经改性的抗体)孵化;当暴露于合适的基底时,这个酶驱动比色反应,并且产生颜色或带荧光标记的目标(染料),这可由适当的成像技术检测。
电泳和接下来的印迹步骤在传统上的特征在于对凝胶和膜片,以及一系列液体(例如缓冲剂、试剂、洗液等)进行许多人工操作。在过去作出了许多尝试来促进工作流以及/或者使工作流自动化,但这样的工作很少成功。
US 5674006公开了用于使流体高效地循环和移动穿过工件的设备的一个示例。该设备可对使用的流体提供自动化操作,而且很适合用来对诸如电泳凝胶的生物试样进行着色和固定。
发明内容
本发明的目标是提供一种新型电泳凝胶盒,该电泳凝胶盒克服了现有技术中的一个或多个缺点。这由独立权利要求中限定的电泳凝胶盒实现。
电泳凝胶盒的优点在于,它有利于操作电泳凝胶,因为它包括刚性支承件,凝胶附连到该刚性支承件上。
根据一个实施例,提供一种电泳凝胶盒,其包括第一面壁部件和第二面壁部件和一个或多个侧壁部件,它们限定用于凝胶部件的凝胶隔室,凝胶隔室具有第一面和第二面,其中,第一面壁部件比第二面壁部件具有更高的凝胶粘合性,由此当盒打开时,模制在盒中的凝胶部件将保持附连到高凝胶粘合性面壁部件上,以及其中,第一面壁部件设有至少一个可移除区段,以暴露凝胶部件的第一面的区段,第一面壁部件的可移除区段比第一面壁部件的不可移除部分具有更低的凝胶粘合性。
根据一个实施例,侧壁部件与形成盒本体的面壁部件中的一个一体地形成。
根据一个实施例,一个可移除区段布置成暴露凝胶部件的第一面的基本对应于分离区的区段。
根据一个实施例,一个或多个可移除区段布置成暴露凝胶部件的第一面的缓冲剂接触区段。
根据一个实施例,电泳凝胶盒包括集成的缓冲剂隔室,并且可选地包括电极。
根据一个实施例,第一和第二面壁部件中的至少一个由塑料膜形成。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于通用电气健康护理生物科学股份公司,未经通用电气健康护理生物科学股份公司许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201380028133.3/2.html,转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇:用于感测环境光的方法和系统
- 下一篇:双眼望远镜