[发明专利]用于生产具有适于血管内给药的尺寸的干细胞的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于制备具有适用于血管内给药的尺寸的干细胞的方法，具体地涉及一种用于制备适合于血管内给药的、具有1-16μm的直径的干细胞的方法。

背景技术

干细胞是指不仅具有自我复制能力，还具有分化为至少两种类型的细胞的能力的细胞，并且可分为全能干细胞、多能干细胞和专能干细胞。全能干细胞是具有能够发育成一个完整个体的全能性质的细胞，而这些性质为卵母细胞和精子受精之后直到八细胞期的细胞所拥有。当这些细胞被分离并移植到子宫内时，就可以发育成一个完整的个体。多能干细胞是能够发育成外胚层、中胚层和内胚层来源的各种细胞和组织的细胞，它们来源于受精后4-5天生成的胚囊内部的内细胞群。这些细胞被称为“胚胎干细胞”，并能分化成各种其他的组织细胞，但不会形成新的活的生物体。专能干细胞是仅能够分化成含有这些细胞的组织和器官特异的细胞的干细胞，它们不仅参与胎儿，新生儿和成人期的各种组织和器官的生长和发育，而且也参与维持成年组织的动态平衡，和组织损伤时的诱导再生功能。组织特异性的专能细胞统称为“成体干细胞”。

成体干细胞是通过从各种人的器官中提取细胞并使该细胞发育为干细胞而获得的，并且其特征在于它们仅分化成特定的组织。然而，近来，用于将成体干细胞分化成各种组织(包括肝细胞)的实验取得了显著的成功，这引起了关注。特别是，已在再生医学领域中努力通过使用细胞进行生物组织和器官的再生，以及恢复因疾病或事故等丧失的功能。在这一领域中经常用于再生医学的方法包括以下步骤：从患者采集干细胞、血液源性的单核细胞或骨髓源性的单核细胞；通过试管培养诱导细胞的增殖和/分化；并通过移植将所选择的未分化(干细胞和/或祖细胞)和/或分化的细胞导入到患者的身体中。因此，预期现有的由药物或手术治疗疾病的经典方法将被用健康的细胞、组织或器官替换受损细胞、组织或器官的细胞/组织替代疗法所替代，因此干细胞的利用将进一步增加。

因此，目前正在研究干细胞的各项功能。特别是，由于使用间充质干细胞的细胞治疗技术开始受到人们的关注，已经开发了用于改善间充质干细胞以使其适合于治疗目的的技术(WO2006/019357，韩国专利号0795708以及韩国专利号0818214)。

然而，与用于制备适合于血管内给药的干细胞的方法相关的技术尚未得到充分研究。

因此，本发明的发明人已经发现，当将干细胞在含有基础培养基和选自N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)、胰岛素或胰岛素样因子、氢化可的松、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和抗氧化剂的组中的至少两种组分的培养基中培养时，可以制备具有适合于细胞内给药的尺寸的干细胞，从而完成了本发明。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种用于制备具有适用于血管内给药的尺寸的干细胞的方法。

本发明的另一个目的是提供一种用于制备具有适用于血管内给药的尺寸的干细胞的培养基组合物。

为了实现上述目的，本发明提供一种制备具有适合于血管内给药的尺寸干细胞的方法，该方法包括在培养基中培养干细胞的步骤，所述培养基包含基础培养基；和选自N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)、胰岛素或胰岛素样因子、氢化可的松、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和抗氧化剂的组中的至少两种组分。

本发明还提供了一种用于制备具有适用于血管内给药的尺寸的干细胞的培养基组合物，所述培养基组合物含有基础培养基；和选自N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)、胰岛素或胰岛素样因子、氢化可的松、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和抗氧化剂的组中的至少两种组分。

附图说明

图1是示出根据培养基和传代数，脂肪源性间充质干细胞的尺寸的图表。

图2是示出根据培养基，脂肪源性间充质干细胞的标记物表达的图表。

具体实施方式

除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所述领域的普通技术人员的普遍理解相同的含义。通常，本文中使用的命名法和实验方法是本领域公知并且通常采用的。

如本文所用，术语“干细胞”指不仅具有自我复制的能力，还具有能够分化为至少两种类型的细胞的能力的细胞。“成体干细胞”是指出现在发育过程后形成胚胎的各个器官的阶段，或出现在成体阶段的干细胞。