[发明专利]表面锚定的轻链诱饵抗体展示系统

权利要求书

1.抗体展示系统，其包含：

（a）分离的宿主细胞；

（b）诱饵，其包含融合到表面锚多肽或其功能片段上的免疫球蛋白轻链或其功能片段；

（c）编码免疫球蛋白轻链可变区的一种或多种多核苷酸；和

（d）编码免疫球蛋白重链可变区的一种或多种多核苷酸。

2.权利要求1的抗体展示系统，其进一步包含：

(i)非栓系的全抗体或其抗原结合片段，其包含由所述多核苷酸编码的所述免疫球蛋白轻和重链；和/或

(ii)与免疫球蛋白重链复合的单价抗体片段，所述免疫球蛋白重链与诱饵的免疫球蛋白轻链复合。

3.权利要求1的抗体展示系统，其中所述宿主细胞是毕赤酵母（Pichia）或酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）细胞。

4.权利要求1的抗体展示系统，

其中编码免疫球蛋白轻链的所述一种或多种多核苷酸来自免疫球蛋白轻链的遗传多样性群体，和/或

其中编码免疫球蛋白重链的所述一种或多种多核苷酸来自免疫球蛋白重链的遗传多样性群体。

5.权利要求1的抗体展示系统，其中所述宿主细胞包含编码诱饵的多核苷酸，其与可调节的启动子可操作地结合。

6.分离的诱饵多肽，其包含免疫球蛋白轻链或其功能片段，任选地通过肽接头，融合到表面锚多肽或其功能片段，其中诱饵多肽任选地氨基末端融合信号肽。

7.权利要求6的多肽，其中所述表面锚多肽是SED-1或其功能片段。

8.权利要求6的多肽，其中所述免疫球蛋白轻链或其功能片段包含κ或λ恒定免疫球蛋白结构域。

9.编码权利要求6的多肽的分离的多核苷酸。

10.包含权利要求9的多核苷酸的载体。

11.分离的宿主细胞，其包含权利要求6的多肽或编码所述多肽的多核苷酸。

12.权利要求11的宿主细胞，其进一步包含编码免疫球蛋白轻链的一种或多种多核苷酸；和/或编码免疫球蛋白重链的一种或多种多核苷酸。

13.权利要求12的宿主细胞，其是毕赤酵母或酿酒酵母细胞。

14.权利要求12的宿主细胞，其中所述诱饵多肽位于细胞膜的表面上。

15.包含权利要求12的宿主细胞的组合物，其进一步包含含有所述免疫球蛋白轻和重链的非栓系的全抗体或其抗原结合片段；和/或诱饵/抗原结合片段或诱饵/抗体；任选地与抗原复合。

16.用于确定从宿主细胞分泌的抗体或其抗原结合片段是否特异性结合抗原的方法，包括将所述抗体展示系统与所述抗原接触，其中所述抗体展示系统包括：

（a）分离的真核宿主细胞，其包含编码免疫球蛋白轻链的一种或多种多核苷酸；和编码免疫球蛋白重链的一种或多种多核苷酸，所述免疫球蛋白重链与诱饵的免疫球蛋白轻链或其功能片段复合；和

（b）诱饵，其包含融合到表面锚多肽或其功能片段上的轻免疫球蛋白链或其功能片段；

并且确定包含所述诱饵与重和轻链免疫球蛋白的诱饵/抗原结合片段或诱饵/抗体是否与所述抗原在细胞表面上特异性结合；

其中如果所述诱饵/抗原结合片段或诱饵/抗体特异性地在细胞表面结合所述抗原，则确定所述分泌的抗体或其抗原结合片段特异性结合所述抗原。

17.权利要求16的方法，其进一步包括分离鉴定的多核苷酸。

18.权利要求16的方法，其进一步包括抑制所述诱饵的表达，并确定对于所述抗原的所述分泌的抗体或其抗原结合片段的亲和力。

19.权利要求16的方法，其进一步包括重组表达由多核苷酸编码的免疫球蛋白链，且任选地，分离包含所述免疫球蛋白的抗体或其抗原结合片段，并任选地生产药物制剂，包括组合所述抗体或其抗原结合片段和药学可接受的载体。