[发明专利]诱导抗原特异性调节性T细胞的方法

权利要求书

1.一种获得载有凋亡细胞或凋亡体的细胞的体外方法，所述方法包括如下步骤：

a)提供针对某一抗原的抗原特异性溶细胞性CD4+T细胞，

b)提供抗原呈递细胞，呈递所述抗原，

c)使所述抗原呈递细胞接触所述溶细胞性CD4+T细胞，由此诱导所述抗原呈递细胞凋亡；

d)从经历步骤c)中的凋亡的抗原呈递细胞分离凋亡细胞或凋亡体；和

e)使所述凋亡细胞或所述凋亡体与能够呈递来自所述凋亡细胞或来自所述凋亡体的抗原的细胞孵育，由此获得载有所述凋亡细胞或凋亡体的细胞。

2.如权利要求1所述的方法，所述方法用于获得抗原特异性调节性T细胞，所述方法还包括如下步骤：

f)使权利要求1所述的步骤e)的加载细胞与另一个CD4+细胞来源接触，由此获得抗原特异性调节性T细胞的群。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述抗原特异性调节性T细胞是Foxp3高CD4+T细胞。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述CD4+T细胞的来源选自下组：原初CD4+T细胞、极化的CD4+T细胞，和天然Treg。

5.如权利要求1～4中任一项所述的方法，其特征在于，所述能够呈递来自所述凋亡细胞或来自所述凋亡体的抗原的细胞选自下组：树突细胞、巨噬细胞、B淋巴细胞和能够表达MHC II类决定簇的细胞。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述凋亡细胞或凋亡体在步骤d)中通过亲和纯化、离心、凝胶过滤、磁珠分选或荧光活化的分选来分离。

7.如权利要求1～6中任一项所述的方法，其特征在于，所述能够呈递来自所述凋亡细胞或所述凋亡体的抗原的细胞选自下组：通过转化外周血单核细胞或骨髓源性的祖细胞获得的未成熟抗原呈递细胞。

8.如权利要求1～7中任一项所述的方法，其特征在于，所述抗原是自体免疫抗原、过敏原或涉及移植物排斥的抗原。

9.如权利要求1～8中任一项所述的方法，其特征在于，所述抗原特异性溶细胞性CD4+T细胞通过如下方式获得：使外周血细胞与肽接触，所述肽包含所述抗原的MHC II类限制性表位和具有基序[CST]-X(2)-C或C-X(2)-[CST]的序列。

10.如权利要求1～9中任一项所述的方法，其特征在于，所述抗原特异性溶细胞性CD4+T细胞获自原初CD4+T细胞、极化的CD4+T细胞或源自天然Treg。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：分离步骤e)中获得的所述载有凋亡细胞或凋亡体的细胞。

12.如权利要求2或3中所述的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：分离所述抗原特异性调节性T细胞。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：基于表面标志物CD25和/或CTLA-4的表达或基于细胞因子TGF-β和/或IL-10的产生或基于Foxp3的表达来将所述抗原特异性调节性T细胞分成不同的亚组。

14.如权利要求2～10中任一项所述获得的抗原特异性Treg的群。

15.如权利要求1或权利要求5～11中任一项所述获得的载有凋亡细胞或凋亡体的细胞的群。

16.作为药物应用的如权利要求14所述的抗原特异性调节性T细胞的群。

17.用于治疗或预防自体免疫疾病、过敏性疾病、移植物排斥或慢性炎性疾病的如权利要求14所述的抗原特异性调节性T细胞的群。

18.用于治疗或预防全身性或器官特异性自体免疫疾病的如权利要求14所述的抗原特异性调节性T细胞的群。

19.用于治疗或预防针对某抗原的自体免疫疾病的如权利要求14所述的抗原特异性调节性T细胞的群，所述抗原选自下组：甲状腺球蛋白、甲状腺过氧化物酶、TSH受体、胰岛素(胰岛素原)、谷氨酸脱羧酶(GAD)、酪氨酸磷酸酶IA-2、髓磷脂少突胶质细胞蛋白和热激蛋白HSP65。