[发明专利]分离方法和分离基质

权利要求书

1.一种将生物分子与液体中的至少一种其它组分分离的方法，所述方法包括使所述液体与包含固体载体和与所述固体载体结合的聚合物链的分离基质接触的步骤，其中所述聚合物链包含从结构CH₂=CH-L-X的第一个单体衍生的单元，其中L是共价键或包含2-6个碳原子的烷基醚或羟基取代的烷基醚链，和X是磺酸根或膦酸根基团。

2.权利要求1的方法，其中所述生物分子是蛋白、肽或核酸。

3.权利要求1或2的方法，其中所述生物分子是免疫球蛋白、免疫球蛋白片段或含免疫球蛋白的蛋白，如抗体、抗体片段、抗体缀合物或抗体融合蛋白。

4.前述权利要求中任一项的方法，其中所述至少其它组分是蛋白，例如宿主细胞蛋白；蛋白A；或免疫球蛋白、免疫球蛋白片段或含免疫球蛋白的蛋白的聚集体。

5.前述权利要求中任一项的方法，其中所述液体是来自先前的色谱步骤的洗脱液，所述色谱步骤例如亲和步骤、离子交换步骤、多峰步骤或疏水相互作用步骤。

6.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述液体是来自分离基质的流通液，所述基质例如离子交换基质、多峰基质或疏水相互作用基质。

7.前述权利要求中任一项的方法，其中所述生物分子是免疫球蛋白、免疫球蛋白片段或含免疫球蛋白的蛋白，例如抗体、抗体片段、抗体缀合物或抗体融合蛋白且其中至少1%，例如至少5%或至少10%的所述生物分子呈聚集体的形式。

8.前述权利要求中任一项的方法，还包括用洗脱缓冲液从所述分离基质洗脱所述生物分子的步骤。

9.前述权利要求中任一项的方法，还包括用清洗液，例如包含至少0.1 mol/l NaOH或0.5-2 mol/l NaOH的碱性清洗液，清洗所述分离基质的步骤。

10.前述权利要求中任一项的方法，其中所述聚合物链是共聚物链且还包含从第二个非荷电单体衍生的单元。

11.权利要求10的方法，其中第二个非荷电单体是N-乙烯基酰胺。

12.权利要求10或11的方法，其中所述第二个非荷电单体选自N-乙烯基吡咯烷酮、N-乙烯基己内酰胺、N-乙烯基甲酰胺和N-乙烯基乙酰胺。

13.前述权利要求中任一项的方法，其中L是共价键或-CH₂-O-L’-，其中L’是C₂-C₄或C₃-C₄亚烷基链，其任选地被至少一个羟基取代。

14.前述权利要求中任一项的方法，其中所述第一个单体选自乙烯基磺酸盐、乙烯基膦酸盐和烯丙氧基羟基丙基磺酸盐。

15.权利要求10-14中任一项的方法，其中在所述共聚物链中，从第一个单体衍生的单元与从第二个单体衍生的单元的摩尔比是0.05至5，例如0.10至2或0.5至2。

16.一种分离基质，其包含固体载体和与所述固体载体结合的共聚物链，其中所述共聚物链包含从以下单体衍生的单元：

a) 结构CH₂=CH-L-X的第一个单体，其中L是共价键或包含2-6个碳原子的烷基醚或羟基取代的烷基醚链，和X是磺酸根或膦酸根基团；和

b) 第二个非荷电单体。

17.权利要求16的分离基质，其中L是共价键或-CH₂-O-L’-，其中L’是C₂-C₄或C₃-C₄亚烷基链，其任选地被至少一个羟基取代。

18.权利要求16或17的分离基质，其中所述至少一个荷电单体选自乙烯基磺酸盐、乙烯基膦酸盐和烯丙氧基羟基丙基磺酸盐。

19.权利要求16-18中任一项的分离基质，其中所述第二个非荷电单体是N-乙烯基酰胺。

20.权利要求16-19中任一项的分离基质，其中所述第二个非荷电单体选自N-乙烯基吡咯烷酮、N-乙烯基己内酰胺、N-乙烯基甲酰胺和N-乙烯基乙酰胺。