[发明专利]使用甲羟戊酸作为底物的3-甲基丁-3-烯-1-醇的酶促生产方法

权利要求书

1.生产3-甲基丁-3-烯-1-醇的方法，所述方法特征在于其包括通过

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶；和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶；

将甲羟戊酸转化为3-甲基丁-3-烯-1-醇，

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

2.权利要求1的方法，所述方法特征在于转化步骤是在体外，在无细胞系统中实施的。

3.权利要求1的方法，所述方法特征在于在存在生产如权利要求1中的所述酶的微生物的条件下实施方法。

4.权利要求2的方法，所述方法由使用生产如权利要求1中的所述酶的多细胞生物表征。

5.组合物，包含

(a)甲羟戊酸；和

(b)至少两种酶，其中一种酶的序列为SEQ ID NO:16；并且另一种酶选自(ii)，其中(i)和(ii)如下：

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶；和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶，

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

6.组合物，包含

(a)甲羟戊酸；和

(b)生产至少两种酶的多细胞生物或微生物，其中一种酶选自(i)并且另一种酶选自(ii)，其中(i)和(ii)如下：

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶；和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶，

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

7.至少两种酶的组合的用途，其中一种酶选自以下的(i)并且另一种酶选自以下的(ii)，或权利要求5或6的组合物的用途，用于从甲羟戊酸生产3-甲基丁-3-烯-1-醇，

其中(i)和(ii)如下：

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶；和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶，

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

8.生产3-甲基丁-3-烯-1-醇的方法，所述方法包括通过使用序列为SEQ ID NO:16的酶和序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的酶将甲羟戊酸3-磷酸酶促转化为3-甲基丁-3-烯-1-醇的步骤。

9.权利要求1或权利要求8的方法，所述方法特征在于使用ATP、dATP、ADP、AMP，非ATP的NTP或dNTP作为共底物实施方法。

10.从甲羟戊酸生产异戊二烯的方法，所述方法包括权利要求1至4、8中任一项的方法，并还包括将生产的3-甲基丁-3-烯-1-醇转化为异戊二烯的步骤。

11.从甲羟戊酸生产异戊醇的方法，所述方法包括权利要求1至4、8中任一项的方法，并还包括将生产的3-甲基丁-3-烯-1-醇转化为异戊醇的步骤。