[发明专利]使用甲羟戊酸作为底物的3-甲基丁-3-烯-1-醇的酶促生产方法有效
申请号: | 201380018861.6 | 申请日: | 2013-04-04 |
公开(公告)号: | CN104245945B | 公开(公告)日: | 2018-10-09 |
发明(设计)人: | M·德勒库特;M·阿尼斯莫瓦;P·马利埃 | 申请(专利权)人: | 环球生物能源;财富科学家股份有限公司 |
主分类号: | C12P7/04 | 分类号: | C12P7/04;C12P5/00;C12N1/00;C12N9/88 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生;林柏楠 |
地址: | 法国*** | 国省代码: | 法国;FR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 使用 甲羟戊酸 作为 甲基 促生产 方法 | ||
1.生产3-甲基丁-3-烯-1-醇的方法,所述方法特征在于其包括通过
(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和
(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶;
将甲羟戊酸转化为3-甲基丁-3-烯-1-醇,
其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。
2.权利要求1的方法,所述方法特征在于转化步骤是在体外,在无细胞系统中实施的。
3.权利要求1的方法,所述方法特征在于在存在生产如权利要求1中的所述酶的微生物的条件下实施方法。
4.权利要求2的方法,所述方法由使用生产如权利要求1中的所述酶的多细胞生物表征。
5.组合物,包含
(a)甲羟戊酸;和
(b)至少两种酶,其中一种酶的序列为SEQ ID NO:16;并且另一种酶选自(ii),其中(i)和(ii)如下:
(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和
(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶,
其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。
6.组合物,包含
(a)甲羟戊酸;和
(b)生产至少两种酶的多细胞生物或微生物,其中一种酶选自(i)并且另一种酶选自(ii),其中(i)和(ii)如下:
(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和
(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶,
其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。
7.至少两种酶的组合的用途,其中一种酶选自以下的(i)并且另一种酶选自以下的(ii),或权利要求5或6的组合物的用途,用于从甲羟戊酸生产3-甲基丁-3-烯-1-醇,
其中(i)和(ii)如下:
(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和
(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶,
其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。
8.生产3-甲基丁-3-烯-1-醇的方法,所述方法包括通过使用序列为SEQ ID NO:16的酶和序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的酶将甲羟戊酸3-磷酸酶促转化为3-甲基丁-3-烯-1-醇的步骤。
9.权利要求1或权利要求8的方法,所述方法特征在于使用ATP、dATP、ADP、AMP,非ATP的NTP或dNTP作为共底物实施方法。
10.从甲羟戊酸生产异戊二烯的方法,所述方法包括权利要求1至4、8中任一项的方法,并还包括将生产的3-甲基丁-3-烯-1-醇转化为异戊二烯的步骤。
11.从甲羟戊酸生产异戊醇的方法,所述方法包括权利要求1至4、8中任一项的方法,并还包括将生产的3-甲基丁-3-烯-1-醇转化为异戊醇的步骤。
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