[发明专利]使用甲羟戊酸作为底物的3-甲基丁-3-烯-1-醇的酶促生产方法有效

专利信息
申请号: 201380018861.6 申请日: 2013-04-04
公开(公告)号: CN104245945B 公开(公告)日: 2018-10-09
发明(设计)人: M·德勒库特;M·阿尼斯莫瓦;P·马利埃 申请(专利权)人: 环球生物能源;财富科学家股份有限公司
主分类号: C12P7/04 分类号: C12P7/04;C12P5/00;C12N1/00;C12N9/88
代理公司: 北京市中咨律师事务所 11247 代理人: 黄革生;林柏楠
地址: 法国*** 国省代码: 法国;FR
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摘要:
搜索关键词: 使用 甲羟戊酸 作为 甲基 促生产 方法
【权利要求书】:

1.生产3-甲基丁-3-烯-1-醇的方法,所述方法特征在于其包括通过

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶;

将甲羟戊酸转化为3-甲基丁-3-烯-1-醇,

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

2.权利要求1的方法,所述方法特征在于转化步骤是在体外,在无细胞系统中实施的。

3.权利要求1的方法,所述方法特征在于在存在生产如权利要求1中的所述酶的微生物的条件下实施方法。

4.权利要求2的方法,所述方法由使用生产如权利要求1中的所述酶的多细胞生物表征。

5.组合物,包含

(a)甲羟戊酸;和

(b)至少两种酶,其中一种酶的序列为SEQ ID NO:16;并且另一种酶选自(ii),其中(i)和(ii)如下:

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶,

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

6.组合物,包含

(a)甲羟戊酸;和

(b)生产至少两种酶的多细胞生物或微生物,其中一种酶选自(i)并且另一种酶选自(ii),其中(i)和(ii)如下:

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶,

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

7.至少两种酶的组合的用途,其中一种酶选自以下的(i)并且另一种酶选自以下的(ii),或权利要求5或6的组合物的用途,用于从甲羟戊酸生产3-甲基丁-3-烯-1-醇,

其中(i)和(ii)如下:

(i)序列为SEQ ID NO:16的第一种酶;和

(ii)序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的第二种酶,

其中通过使用如(i)和(ii)中定义的酶的组合的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产高于通过单独使用任一种酶所实现的3-甲基丁-3-烯-1-醇生产或任一种酶单独实现的生产的相加。

8.生产3-甲基丁-3-烯-1-醇的方法,所述方法包括通过使用序列为SEQ ID NO:16的酶和序列选自SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18的酶将甲羟戊酸3-磷酸酶促转化为3-甲基丁-3-烯-1-醇的步骤。

9.权利要求1或权利要求8的方法,所述方法特征在于使用ATP、dATP、ADP、AMP,非ATP的NTP或dNTP作为共底物实施方法。

10.从甲羟戊酸生产异戊二烯的方法,所述方法包括权利要求1至4、8中任一项的方法,并还包括将生产的3-甲基丁-3-烯-1-醇转化为异戊二烯的步骤。

11.从甲羟戊酸生产异戊醇的方法,所述方法包括权利要求1至4、8中任一项的方法,并还包括将生产的3-甲基丁-3-烯-1-醇转化为异戊醇的步骤。

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