[发明专利]使用离心辅助的感染以增加病毒滴度在审
申请号: | 201380013555.3 | 申请日: | 2013-03-13 |
公开(公告)号: | CN104160019A | 公开(公告)日: | 2014-11-19 |
发明(设计)人: | D·R·阿舍;A·H·莱希 | 申请(专利权)人: | EMD密理博公司 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;C12N7/02;C12M1/10 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 过晓东 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 使用 离心 辅助 感染 增加 病毒 | ||
1.一种为了在病毒清除研究中增加计算对数减少(LRV)的目的而增加病毒原液的观察滴度的方法,所述方法包括以下步骤:
a)提供病毒原液、细胞培养基、指示细胞系和测定板;
b)将所述指示细胞系和培养基加入所述测定板;
c)将所述病毒原液加入所述测定板上的细胞系和培养基;
d)离心包含所述细胞系、培养基和病毒原液的测定板;
e)终止所述离心步骤;以及
f)测量所得的病毒原液的滴度,其中所得的病毒原液的滴度比不存在离心步骤(f)的情况下测量的病毒滴度高10倍。
2.权利要求1的方法,其中所述病毒原液为逆转录病毒。
3.权利要求2的方法,其中所述逆转录病毒为鼠白血病病毒。
4.权利要求2的方法,其中所述测定板选自组织培养板、孔板、烧瓶或试管。
5.权利要求1的方法,其中离心步骤(d)在约50xg-2400xg的g力范围下进行约5分钟-24小时。
6.权利要求5的方法,其中离心步骤(d)在约500xg-1000xg的g力范围下进行约30分钟-120分钟。
7.权利要求1的方法,其中离心步骤(d)期间的温度为约4℃-39℃。
8.权利要求1的方法,其中离心步骤(d)期间的温度为约21℃-39℃。
9.权利要求1的方法,其还包括温育步骤,其中在离心步骤(d)之前温育包含病毒原液、培养基和细胞系的测定板。
10.权利要求1的方法,其还包括温育步骤,其中在离心步骤(d)之后温育包含病毒原液、培养基和细胞系的测定板。
11.权利要求1的方法,其还包括温育步骤,其中在离心步骤(d)之前和之后温育包含病毒原液、培养基和细胞系的测定板。
12.权利要求1的方法,其中所述病毒原液是预稀释的。
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