[发明专利]包含分泌-样免疫球蛋白的组合物

说明书

【技术领域】

本发明涉及制备包含分泌-样免疫球蛋白，尤其是分泌-样IgA和/或分泌-样IgM的组合物的方法，及可由该方法获得的组合物。

【背景技术】

IgA是在人血浆中在IgG之后第2最丰富的Ig类，其在血浆中以0.88～4.10g/L存在。有2种IgA亚类，IgA1和IgA2(图1)(Zuercher AW等人，Plasma derived immunoglobulins.Principles of Immunopharmacology.3rd ed.2011：p.271-301)，它们不同在于，它们的连接重和轻链的二硫键，以及它们的由于分子的铰链区中的显著差异而致的抗原性多样性。2种亚类的糖基化模式不同：两种亚类的重链是N-糖基化的；相反，由于IgA2的截短的铰链区，O-糖基化见于IgA1但不IgA2。

人IgA见于2种主要形式：在血/血浆中循环，或分泌到粘膜表面。在血浆中，IgA是主要作为单体存在(80～90％)，及由骨髓浆细胞产生；血浆中的主要亚类是IgA1。

术语多聚体IgA(pIgA)描述由接合(J)链在它们的“尾部”共价接合的二聚，偶尔四聚体IgA(图1)。

IgM分子占总血清Ig含量的10％。它们被主要限制在血管内库，且是初次，抗原-特异性，体液免疫应答的部分；系统发生地和个体发生地，它们是最早的抗体(Ab)分子。IgM主要作为由J链接合的及排列为平面结构的五聚体存在；偶尔，IgM也可见于缺少J链的六聚体形式(Zuercher AW等人，Plasma derived immunoglobulins.Principles of Immunopharmacology.3rd ed.2011:p.271-301)。

消化道，呼吸道和泌尿生殖道，以及外分泌腺管的粘膜表面下衬有形成分隔身体的内部隔室与外部环境的紧密屏障的上皮细胞层。在人中，这些巨大表面覆盖400m²，永久暴露于外源病原体的面积(Corthésy,B.(2010)Future Microbiol.5:817-829)。先天性和诱导性细胞和分子机理的组合确保保护免于微生物定居和进入/侵入。在健康个体中，分泌性IgA(SIgA)是在粘膜表面的腔侧上实现免疫排除功能的最丰富的抗体(Ab)(Macpherson,A.J.et al.(2008)Mucosal Immunol.1:11-22)，然而在IgA-缺陷型患者中，分泌性IgM Ab取而代之。SIgA由肠固有层，上呼吸道或尿-生殖道的粘膜浆细胞合成。SIgA由pIgA二聚体，及大致75kDa的高度糖基化的分泌组分(SC)(图1)组成；类似地，与SC结合的五聚体的、含有J链的IgM构成SIgM。SC表示聚合物Ig受体(pIgR)的细胞外部分。pIgA或五聚体IgM自产生位点到粘膜表面的跨上皮运输需要pIgR，其中pIgR-pIgA/pIgR-IgM复合物由酶促切割转化为SIgA/SIgM(Zuercher AW等人，Plasma derived immunoglobulins.Principles of Immunopharmacology.3rd ed.2011:p.1-31)。与SC结合保护IgA或IgM免于蛋白水解降解。SIgA是浆液粘液性分泌诸如唾液，气管-支气管分泌，初乳，乳，泪，肠分泌和尿-生殖分泌中的主要Ig。其是在粘膜衬(由此在人身体中)产生的最显著的Ig；大致3～5g的SIgA每天分泌进肠腔。由此，SIgA对于免疫排除及对于维持上皮完整性是必要的。SIgM以更低水平存在，但与SIgA实现相同的免疫排除功能。