[发明专利]阴离子交换-疏水性混合模式

说明书

提供阴离子交换‑疏水混合模式配体及其使用方法。

相关专利申请的交叉引用

本申请要求2012年3月8日提交的美国临时专利申请号61/608,418的优先权权益，其通过引用纳入本文用于所有目的。

发明背景

免疫球蛋白的液体源主要是哺乳动物体液或细胞培养收获物，来自液体源的免疫球蛋白提取物对于获得充分浓缩或纯化形式的免疫球蛋白来用于诊断和治疗用途以及一般实验室研究而言是重要的。类似地，纯化其它种类的蛋白质和来自生物样品的其它分子也是有价值的。

发明内容

提供连接至配体的色谱固体支持物(支持物(Support))。在一些实施方式中，所述支持物和配体具有下式：

支持物-(X)-N(R¹,R²)-R³-L-Ar，其中，X是间隔子或不存在；R¹和R²各自选自氢和包含1～6个碳的烷基；R³是包含1～6个碳的烷基或包含1～6个碳的环烷基；L是NR⁴、O或S；其中R⁴是氢或包含1～6个碳的烷基；且Ar是芳基。

在一些实施方式中，R¹和R²是氢。

在一些实施方式中，R³是包含1～4个碳的烷基。

在一些实施方式中，R³是包含1、2、3、4、5或6个碳的烷基。

在一些实施方式中，所述芳基是苯基。在一些实施方式中，所述芳基是经取代的苯基。在一些实施方式中，所述经取代的苯基是烷基取代的苯基。

在一些实施方式中，R¹和/或R²是包含1～6个碳的烷基且Ar是烷基取代的苯基。

在一些实施方式中，所述配体是N-苯基乙二胺或其盐。在一些实施方式中，所述配体是2-苯氧基乙胺或其盐。

在一些实施方式中，X(接头/间隔子)不存在。在一些实施方式中，X是间隔子。

还提供从样品纯化生物分子的方法。在一些实施方式中，所述方法包括：使该样品接触如上文或本文中他处所述的连接至配体的色谱固体支持物；和收集纯化的生物分子。

在一些实施方式中，所述生物分子是蛋白质。在一些实施方式中，所述蛋白质是抗体。

在一些实施方式中，所述样品包含单体抗体和聚集体，并且使单体抗体与所述聚集体分离，从而导致单体抗体的纯化。

在一些实施方式中，所述纯化的生物分子是单体抗体。在一些实施方式中，所述样品的单体抗体被固定在所述色谱固体支持物上，随后被洗脱。在一些实施方式中，所述样品的单体抗体流经所述色谱固体支持物并被收集。

定义

“抗体”是指免疫球蛋白、其复合(例如，融合)形式或其片段形式。该术语可包括但不限于：源自人或其它哺乳动物细胞系的IgA、IgD、IgE、IgG和IgM类的多克隆或单克隆抗体，包括天然形式或遗传修饰形式，如人源化、人、单链、嵌合、合成、重组、杂合、突变、移接和体外产生的抗体。“抗体”也可包括复合形式，其包括但不限于含有免疫球蛋白部分的融合蛋白。“抗体”还可包括抗体片段，如Fab、F(ab')2、Fv、scFv、Fd、dAb、Fc，无论它们是否保留抗原结合功能。