[发明专利]减少1->3读框移位的方法

权利要求书

1.一种在大肠杆菌细胞中重组生产包含三肽QKK的(全长)多肽的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

-从包含编码所述多肽的核酸的细胞或包含编码所述多肽的核酸的大肠杆菌细胞的培养物的培养基回收所述多肽，从而生产所述多肽，

其中包含在所述多肽中的三肽QKK由寡核苷酸cag aaa aaa，或寡核苷酸caa aag aaa编码。

2.一种在大肠杆菌中重组生产包含三肽QKK的全长多肽的过程中减少副产物形成的方法，其包括以下步骤：

-在编码多肽的核酸中，取代编码三肽QKK的寡核苷酸caa aaa aag(SEQ ID NO.01)，或寡核苷酸caa aag aag(SEQ ID NO：02)，或寡核苷酸cag aag aag(SEQ ID NO：03)中的一到三个核苷酸以获得寡核苷酸caa aag aaa(SEQ ID NO：04)，或寡核苷酸cag aaa aaa(SEQ ID NO：05)，从而产生取代的编码多肽的核酸，和

-从包含编码所述多肽的取代的核酸的细胞或包含编码所述多肽的取代的核酸的细胞的培养物的培养基回收所述多肽，从而在重组生产包含所述三肽QKK的多肽的过程中减少副产物形成。

3.根据权利要求1或2任一项所述的方法，其特征在于所述方法包括以下另外步骤中的一个或更多个：

-提供包含三肽QKK的多肽的氨基酸序列或编码核酸，和/或

-用编码所述多肽的取代的核酸转染细胞，和/或

-培养转染有所述取代的核酸的细胞(在适于表达所述多肽的条件下)，和/或

-从细胞或培养基回收所述多肽，和/或

-任选地以一个或更多个层析步骤纯化生产的多肽。

4.根据权利要求2至3任一项所述的方法，其特征在于以一至五个层析步骤纯化生产的多肽。

5.根据在前权利要求中任一项所述的方法，其特征在于所述多肽是载脂蛋白A-I，或具有载脂蛋白A-I功能的其变体，或其融合多肽。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述多肽具有选自包含SEQ ID NO：09至SEQ ID NO：14的组的氨基酸序列。

7.根据权利要求5至6任一项所述的方法，其特征在于所述多肽具有SEQ ID NO：11的氨基酸序列。