[发明专利]带电的氟碳化合物组合物在纯化生物分子的方法中的用途在审
申请号: | 201380009032.1 | 申请日: | 2013-03-18 |
公开(公告)号: | CN104105703A | 公开(公告)日: | 2014-10-15 |
发明(设计)人: | M·科兹洛夫;W·莫亚;J·贾比尔;W·卡塔尔多;A·波蒂;C·希列斯彼 | 申请(专利权)人: | EMD密理博公司 |
主分类号: | C07K1/16 | 分类号: | C07K1/16;C07K1/34;C12Q1/70;C12M1/12 |
代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 过晓东 |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 带电 碳化 组合 纯化 生物 分子 方法 中的 用途 | ||
1.一种从样品去除靶生物分子的方法,所述方法包括:
(i)提供包含所述靶生物分子的样品;以及
(ii)使所述样品与具有用带电的氟碳化合物组合物修饰的表面的多孔固体支持物接触,其中所述靶生物分子结合至该经修饰的固体支持物,
从而从所述样品中去除所述靶生物分子。
2.权利要求1的方法,其中所述靶生物分子为可溶性杂质。
3.权利要求2的方法,其中所述可溶性杂质为宿主细胞蛋白。
4.权利要求1的方法,其中所述靶生物分子为病毒或病毒颗粒。
5.权利要求4的方法,其还包括回收结合的靶生物分子的步骤。
6.一种降低包含靶蛋白以及一种或多种杂质的样品中所述一种或多种杂质的水平的方法,所述方法包括以下步骤:
(i)提供包含靶蛋白以及一种或多种杂质的样品;
(ii)使所述样品与具有用带电的氟碳化合物组合物修饰的表面的多孔固体支持物接触;以及
(iii)获得流出物,
其中相对于(i)中所述样品中一种或多种杂质的水平,所述流出物包含较低水平的所述一种或多种杂质。
7.权利要求6的方法,其中所述样品包括细胞培养进料。
8.权利要求1的方法,其中所述样品包含至少100mM的盐浓度。
9.权利要求6的方法,其中所述样品包含至少100mM的盐浓度。
10.权利要求1的方法,其中所述带电的氟碳化合物组合物包含以下结构:
其中R1选自磺酸、硫酸、膦酸、磷酸和羧酸残基;R2为任选存在的连接单元,其选自短的饱和及不饱和烃基;R3为F、Cl或C1-C10全氟烷基基团,并且F为氟基团。
11.权利要求6的方法,其中所述带电的氟碳化合物组合物包含以下结构:
其中R1选自磺酸、硫酸、膦酸、磷酸和羧酸残基;R2为任选存在的连接单元,其选自短的饱和及不饱和烃基;R3为F、Cl或C1-C10全氟烷基基团,并且F为氟基团。
12.权利要求10的方法,其中R2为x的范围为1-约10且y的范围为0-约20的CxHy基团或烷氧基、酯、酰胺等。
13.权利要求11的方法,其中R2为x的范围为1-约10且y的范围为0-约20的CxHy基团或烷氧基、酯、酰胺等。
14.一种从样品纯化靶分子的流过方法,所述方法包括以下步骤:
(a)使包含所述靶分子以及一种或多种杂质的样品进行A蛋白亲和层析方法;
(b)使来自步骤(a)的A蛋白洗脱液流过活性炭介质;
(c)使来自(b)的产物流过阴离子交换层析介质;
(d)使来自(c)的产物流过阳离子交换层析介质;
(e)使来自(d)的产物流过具有用带电的氟碳化合物组合物修饰的表面的多孔固体支持物;
(f)使来自(e)的产物流过病毒过滤介质;以及
(g)回收来自(f)的产物,从而纯化所述靶分子。
15.权利要求14的方法,其中所述靶分子为抗体。
16.权利要求15的方法,其中所述抗体为单克隆抗体。
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