[发明专利]高纯度的甜菊醇糖苷

说明书

描述了制备高度纯化的甜菊醇糖苷，特别地莱鲍迪苷A、D和X的方法。所述方法包括表达来自甜叶菊的UDP‑葡萄糖基转移酶，所述酶能够将某些甜菊醇糖苷转化成莱鲍迪苷A、D和X。高度纯化的莱鲍迪苷A、D和X在可食用和可咀嚼组合物例如任何饮料、糕饼、焙烤食品、饼干和口香糖中可用作无热量甜味剂。

技术领域

本发明涉及用于制备包含甜菊醇糖苷(steviol glycoside)的组合物，包括高度纯化的甜菊醇糖苷组合物的生物催化法。

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将2013年3月12日创建的、具有5KB(千字节)的数据并且与本文同时提交的、标题为PureCircle_22PCT_ST25.txt的文本文件通过引用整体并入本申请。

发明背景

高强度甜味剂具有比蔗糖甜味水平高许多倍的甜味水平。它们基本上是无热量的并且通常用于饮食和低卡路里产品，包括食品和饮料。高强度甜味剂不引发升糖反应，从而使得它们适合用于针对糖尿病患者的产品和目的在于控制碳水化合物摄入的其它产品。

甜菊醇糖苷是一类在甜叶菊(stevia rebaudiana Bertoni)(原产于南美某些地区的菊科(Asteraceae(Compositae))的多年生灌木)叶中发现的化合物。它们的结构特征在于单个碱，甜菊醇，差异在于位置C13和C19上碳水化合物残基的存在。它们在甜菊属(Stevia)叶中积累，构成约10%-20%的总干重。基于干重，在甜菊属叶中发现的4种主要糖苷通常包括甜菊苷(stevioside)(9.1%)、莱鲍迪苷A(3.8%)、莱鲍迪苷C(0.6-1.0%)和杜尔可苷A(dulcoside A)(0.3%)。其它已知的甜菊醇糖苷包括莱鲍迪苷(rebaudioside)B、C、D、E、F和X，甜菊双苷(steviolbioside)和甜叶悬钩子苷(rubusoside)。

虽然已知用于从甜叶菊制备甜菊醇糖苷的方法，但这些方法大多不适合于商业使用。

因此，仍然存在对用于制备包含甜菊醇糖苷的组合物(包括高度纯化的甜菊醇糖苷组合物)的简单、高效且经济的方法的需要。

发明概述

本发明提供了通过下述来制备包含靶甜菊醇糖苷的组合物的生物催化法：将包含甜菊醇糖苷底物的起始组合物与UDP-葡萄糖基转移酶接触，从而产生包含靶甜菊醇糖苷的组合物，所述靶甜菊醇糖苷与甜菊醇糖苷底物相比，包含一个或多个额外的葡萄糖单位。

起始组合物可以是包含至少一种甜菊醇糖苷底物的任何组合物。在一个实施方案中，甜菊醇糖苷底物选自甜菊单苷(steviolmonoside)、甜菊双苷、甜叶悬钩子苷、杜尔可苷B、杜尔可苷A、莱鲍迪苷B、莱鲍迪苷G、甜菊苷、莱鲍迪苷C、莱鲍迪苷F、莱鲍迪苷A、莱鲍迪苷I、莱鲍迪苷E、莱鲍迪苷H、莱鲍迪苷L、莱鲍迪苷K、莱鲍迪苷J、莱鲍迪苷X、莱鲍迪苷D、莱鲍迪苷N、莱鲍迪苷O、合成的甜菊醇糖苷或其组合。起始组合物可以是商购获得的或制备的。起始组合物可包含纯化的甜菊醇糖苷底物或部分纯化的甜菊醇糖苷底物。

在一个实施方案中，甜菊醇糖苷底物是甜叶悬钩子苷。

在另一个实施方案中，甜菊醇糖苷底物是甜菊苷。

在另一个实施方案中，甜菊醇糖苷底物是莱鲍迪苷A。

在另一个实施方案中，甜菊醇糖苷底物是莱鲍迪苷D。

靶甜菊醇糖苷可以是任何已知的甜菊醇糖苷。在一个实施方案中，靶甜菊醇糖苷是甜菊单苷、甜菊双苷、甜叶悬钩子苷、杜尔可苷B、杜尔可苷A、莱鲍迪苷B、莱鲍迪苷G、甜菊苷、莱鲍迪苷C、莱鲍迪苷F、莱鲍迪苷A、莱鲍迪苷I、莱鲍迪苷E、莱鲍迪苷H、莱鲍迪苷L、莱鲍迪苷K、莱鲍迪苷J、莱鲍迪苷X、莱鲍迪苷D、莱鲍迪苷N、莱鲍迪苷O或合成的甜菊醇糖苷。

在一个实施方案中，靶甜菊醇糖苷是甜菊苷。