[实用新型]全局调控因子IrrE、Csp及CarD蛋白的金标快速联检试剂盒

说明书

技术领域：

本实用新型涉及全局调控因子IrrE、Csp及CarD蛋白的金标快速联检试剂盒。

背景技术：

IrrE、Csp及CarD蛋白是在目前在转基因生物的研究工作中，或在对转基因产品进行筛选或安全性评价时，经常需要同时进行检测的三种外源性基因。如果分别进行检测，不但操作很繁琐，而且检测成本高。

IrrE蛋白是耐辐射球菌中的全局调控因子，将irrE基因导入大肠杆菌中能够显著增强其辐射抗性、氧化抗性和耐盐能力。而且将该基因导入植物后，明显提高了植物的耐盐和抗旱能力。

CSP蛋白是一种冷胁迫应激蛋白，作为一种分子伴侣与单链核酸非特异性结合，具有稳定单链核苷酸二级结构的作用，使细胞在极端环境下存活下来。将冷激蛋白基因（csp）转入植物后，赋予了植物较强的耐盐及抗旱性能。目前，冷激蛋白CSP编码基因已应用于多种转基因植物的研究。

CarD蛋白是一类全局调控转录因子，在DNA复制、重组、修复以及基因转录等生物过程中发挥着重要的作用。UV辐射胁迫条件下全基因组转录组学分析发现CarD蛋白在UV辐射后被诱导，可能参与了DNA损伤修复过程的调控。在可自然转化和易于遗传操作的模式菌株D.radiodurans中，敲除了相应的CarD编码基因，发现与野生型菌株相比在UV辐照、过氧化氢、乙醇以及饥饿胁迫下，其表型的存在明显差异。

因此，实践中很需要有一种可同时检测转基因植物中IrrE、Csp及CarD蛋白，且操作简便、结果准确可靠、快速的装置。

实用新型内容：

本实用新型的目的是建立一种操作简便、结果准确可靠、快速，并能同时检测3种不同转基因成分的检测试剂盒。

本实用新型的技术方案是这样的：全局调控因子IrrE、Csp及CarD蛋白的金标快速联检试剂盒，由底板、上盖组成；其特征为，所述试剂盒的形状为三角形盒体，盒体的底板上设置有3条测试带；上盖有3个观测窗和3个加样孔。

所述3条测试带分别位于所述三角形盒体底板表面的三边；

所述3个加样孔分别位于所述三角形盒体上盖表面的三边。

所述底板或上盖可具有卡槽，以保证底板与上盖扣紧。

所述观测窗优选是长方形。

试剂盒的优选的形状为扁平的三角形盒。

本实用新型的目的是这样实现的：当底板盖入上盖后，每个观测窗对应一条测试带，通过盒盖上的单一的加样孔及3个观测窗可进行加样和观察检测结果，每个观测窗可分别检查一种基因。

在本实用新型的一个优选的实例中，以转植物的CarD蛋白的检测为例：

试剂盒为三角形扁盒，盒底板沿三角形的三条边各设置有一条凹槽，可放置3条测试带；上盖与测试带相应位置有3个观测窗，3个加样孔设置在上盖三个顶角处（见图1、图2）。

3条测试带以此种方式分布，一是加样方便，可同时加样以检查3种基因，二是检测结果互不受影响。

上述3条测试带，一条用于检测CarD蛋白，一条用于检测IrrE蛋白，另一条用于检测Csp蛋白。所述测试带是一种具有检测系统主体膜反应体系功能的检测材料，由高分子纤维膜、塑料等多层材料制成。3种蛋白的测试带均可分为质控区和检测区，质控区可包被羊抗鼠IgG或兔抗鼠IgG多克隆抗体；CarD蛋白测试带的样品检测区包被特异功能性CarD，IrrE蛋白测试带的样品检测区包被IrrE，Csp蛋白测试带的样品检测区包被特异功能性Csp的单克隆抗体或多克隆抗体。

每个观测窗分为测试区（T）和质控区（C）两部分，可在上盖上用字母C、T标示出；

检测时，将送检物品的提取液分别滴加在试剂盒的加样孔中，5－10分钟后，通过肉眼就可以通过上盖的观测窗直接观察到准确的检测结果。

对于每个观测窗来说，用以下方式判断检测结果：

1、阴性（-）：

反应状况：观测窗质控区（C）出现一条紫红色条带。

检测结果：待检样品中不含待检基因或其含量在其阈值以下。

2、阳性（+）：

反应状况：观测窗质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内同时出现紫红色条带。检测结果：待检基因含量在阈值以上。

3、无效：

反应状况：质控区（C）未出现紫红色条带，

检测结果：表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。