[实用新型]用于检测神经母细胞瘤微小残留的试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型属于生物技术领域，涉及一种用于检测神经母细胞瘤微小残留的试剂盒。

背景技术

神经母细胞瘤(neuroblastoma，NB)是儿童最常见的颅外肿瘤，是婴幼儿最常见的肿瘤。有将近一半的神经母细胞瘤发生在2岁以内的婴幼儿。神经母细胞瘤属于神经内分泌性肿瘤，可以起源于交感神经系统的任意神经脊部位。其最常见的发生部位是肾上腺，但也可以发生在颈部、胸部、腹部以及盆腔的神经组织。对于神经母细胞瘤的发病原因尚不清楚。一些遗传易感因素被发现与神经母细胞瘤的发病相关。家族型神经母细胞瘤被证明与间变淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase，ALK）的体细胞突变（somatic mutation）所导致。此外，在神经母细胞瘤还发现有许多分子突变。N-myc基因的扩增突变在神经母细胞瘤也很常见。其扩增类型呈双向分布：在一个极端为3-10倍扩增，在另一个极端为100-300倍扩增。N-myc基因的扩增突变往往与肿瘤的扩散相关。LMO1基因被证明与肿瘤的恶性程度相关。目前认为神经母细胞瘤的病因是以上因素互相作用导致的。

目前，神经母细胞瘤的诊断及检测方法主要有影像学检测法、骨髓形态学检测法、检测尿VMA/AVA，VMA及HVA、骨髓或组织活检；这些诊断、检测方法的优缺点如下：

影像学检测法：间位腆代苄胍与放射性物质如碘-131或者是碘-123耦联后，即可作为放射性药物而用于神经母细胞瘤的诊断以及疗效监测。但不能判断肿瘤病理类型，而且碘-131、碘-123耦联有放射性对身体有害。

骨髓形态学检测法：能见到密集成巢或小叶性分布，成菊花状、环状，其细胞成分不一，分化程度不等，但单个弥散分布的NB细胞体积形态与急淋、急粒细胞相似，不仔细观察极易误诊。而且通常只看200-500个细胞，检测灵敏度低。

检测尿VMA/AVA，VMA及HVA：神经母细胞瘤时儿茶酚胺合成增加,故其代谢物尿VMA/HVA增加。可用分光光度法、层析法检测，但尿液中有大量的化合物，尤其是苯酣类、酸性酣和芳香环化合物的代谢物。能干扰结果，而且分光光度法特异性较差。

骨髓或组织活检：免疫组化学检查显微镜下，神经母细胞瘤呈现为蓝染的小圆形细胞，菊花形排列。肿瘤细胞围绕神经毡（neuropil）呈菊花形排列，其他还有一些神经母细胞瘤所特异的免疫组化染色，用以与其他肿瘤（尤因肉瘤，淋巴瘤等）进行鉴别诊断。但操作复杂，对患者损伤较大。

临床急需一种检测速度快，而且灵敏度高的检测技术的出现，更有利于患者的及时诊治。

实用新型内容

为了解决上述技术问题，本实用新型的目的在于提供一种用于检测神经母细胞瘤微小残留的试剂盒，可以快速、简便、高灵敏度地检测神经母细胞瘤微小残留。

为实现上述目的，本实用新型采取的技术方案是：一种用于检测神经母细胞瘤微小残留的试剂盒，包括盒体（1）、盒盖（2）和设置在盒体（1）内的衬垫（3），所述衬垫（3）上设有小孔，装有荧光标记的单克隆抗体CD45的试剂管（4）、装有荧光标记的单克隆抗体CD9的试剂管（5）、装有荧光标记的单克隆抗体CD81的试剂管（6）、装有荧光标记的单克隆抗体CD56的试剂管（7）、装有红细胞裂解液的试剂管（8）和装有PBS缓冲液的试剂管（9）被设置在所述小孔内。

其中，上述单克隆抗体使用不同的荧光标记；优选地，单克隆抗体CD45使用PerCP标记，单克隆抗体CD9使用FITC标记，单克隆抗体CD81使用PE标记，单克隆抗体CD56使用APC标记。

其中，所述红细胞裂解液和所述PBS缓冲液均为本领域常规试剂。

其中，所述衬垫（3）上设有6个小孔，所述小孔在所述衬垫（3）上分成两排平行排列。

通过以上技术方案，本实用新型的有益效果如下：

（1）本实用新型的试剂盒结构简单、设计合理，方便携带、保存，不易受污染。

（2）本实用新型的试剂盒在使用时，检测速度快、操作方法简单，检测灵敏度高，检测中受检测者主观因素的影响小，特别是可以准确检测已经确诊并经过治疗之后残留的神经母细胞瘤病灶，适于在临床广泛推广应用。

附图说明

图1为本实用新型的结构示意图；

在该图中，1-盒体，2-盒盖，3-衬垫，4-装有荧光标记的单克隆抗体CD45的试剂管，5-装有荧光标记的单克隆抗体CD9的试剂管，6-装有荧光标记的单克隆抗体CD81的试剂管，7-装有荧光标记的单克隆抗体CD56的试剂管，8-装有红细胞裂解液的试剂管，9-装有PBS缓冲液的试剂管。