[实用新型]硝基呋喃类药物代谢物胶体金快速检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种硝基呋喃类药物代谢物的胶体金快速检测试剂盒，特别适用于水样及水产品中硝基呋喃类药物代谢物的快速检测。

背景技术

近年来，我国水产养殖业发展迅猛，由于养殖集约化程度提高，养殖病害日益严峻，各类药物在生产中广泛使用，水产品药物残留问题日益突出。硝基呋喃类药物对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌、真菌和原虫等病原体均有杀灭作用，具有杀菌能力强、抗菌谱广、不易产生耐药性、价格低廉、疗效好等优点，曾经在水产养殖业中广泛使用。但经研究表明硝基呋喃类药物及其代谢产物具有很大的毒性，有致畸胎副作用，且能诱发癌症，因而引起了人们的高度重视。美国、日本、欧盟先后全面规定禁止使用呋喃类抗菌物质，在动物源性食品中呋喃类残留物的检出限为不得检出。我国也于2002年颁布了禁止使用硝基呋喃类抗生素的禁令。不过由于此类药物价格低，药效好，很多养殖单位还在继续使用。近年来，水产品硝基呋喃类药物残留超标事件屡屡发生，严重威胁着人民身体健康和我国水产品出口贸易。

硝基呋喃类药物是人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的广谱抗菌药物，主要是指呋喃唑酮(Furazolidone)、呋喃西林(Furacillin)、呋喃妥因(Nitrofurantion)和呋喃它酮(Furaltadone)，代谢产物分别为AOZ、SEM、AHD、AMOZ。硝基呋喃类药物很不稳定，在体内代谢很快，代谢的部分化合物分子与细胞膜蛋白结合成为结合态，可长期保持稳定，从而延缓药物在体内的消除速度。普通的食品加工方法如烧烤、微波加工、烹调等难以使蛋白结合态呋喃唑酮残留物降解，但这些代谢物可以在弱酸性条件下从蛋白质中释放出来。因此，当含有硝基呋喃类抗生素残留的水产品为人所食用后，这些代谢物就可以在胃酸作用下从蛋白质中释放而被人体吸收，造成严重危害。由于硝基呋喃类药物代谢产物比较稳定，所以在食品安全的残留检测中以代谢物作为该类药物残留的标志物。

目前用于此类药物代谢物残留的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱一质谱法(LC-MS)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、分光光度法、免疫分析法等。高效液相色谱及其联用法虽然定量检测灵敏度较高，但由于仪器昂贵，操作繁琐，在基层单位很难大规模推广使用。分光光度法不需昂贵的仪器与试剂，样品前处理操作简单，但测定结果准确度较低。免疫分析法主要包括酶联免疫法，虽然灵敏度高，但还是存在检测费用高、操作复杂的缺点。免疫分析法还可包括胶体金免疫层析法，近年来已有利用胶体金法检测水产品中硝基呋喃类药物代谢物残留的报道，但灵敏度较低。本实用新型在传统的胶体金免疫层析试纸基础上进行了改进，将胶体金标记抗体复合物直接冻干于微孔中，使得检测过程中待测样本与金标抗体充分反应，提高检测灵敏度，可经济、快速地检测鱼、虾等水产样品中的硝基呋喃类药物代谢物残留，且检测试剂盒可一次检测AOZ、SEM、AHD、AMOZ残留，节省检测时间，为水产品中硝基呋喃类药物代谢物残留提供了新的检测手段。

发明内容

本实用新型克服了现有技术中存在的一些缺点，提供了一种胶体金免疫层析法检测水产品中硝基呋喃类药物代谢物残留的试剂盒。

为解决上述技术问题，本实用新型是通过以下技术方案实现的：

硝基呋喃类药物代谢物胶体金快速检测试剂盒包括检测板和微孔试剂。

检测板包括板体、盖体和检测试纸。检测试纸包括呋喃唑酮代谢物AOZ、呋喃西林代谢物SEM、呋喃妥因代谢物AHD、呋喃它酮代谢物AMOZ检测试纸。检测试纸由底板、吸水板、硝酸纤维素膜、样品吸液板组成，底板中部为硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上有一条试验线(T线)和一条控制线(C线)，在底板一端端头为吸水板，另一端端头为样品吸液板，硝酸纤维素膜两端分别与吸水板和样品吸液板相互交叠连接(交叠连接部分1～2毫米)，其中试验线由硝基呋喃类药物代谢物-大分子蛋白偶联物包被，控制线靠近吸水板由羊抗鼠多克隆抗体包被。

板体和盖体通过插接方式连接，板体设有4个与检测试纸对应的凹槽，板体正面标记有信息记录表、结果判读说明、检测对象指示和结果显示窗口。

区分现有技术手段，将AOZ、SEM、AHD、AMOZ单克隆抗体-胶体金标记物直接冻干于微孔中，制成4种对应的微孔试剂。