[实用新型]单克隆抗体杂交瘤的高效筛选盖板及筛选盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及免疫学检测技术领域，具体的说是一种用于ELISA方法筛选单克隆抗体杂交瘤的高效筛选盖板及筛选盒。 

背景技术

单克隆抗体由于其特异性高一直受到免疫学检测领域和生物医药领域的青睐并在相关领域被广泛应用,从1975年单抗技术被发明以来,该技术一直是各个生命科学相关领域最经典的技术之一。在单克隆抗体的研发过程中最耗费精力的步骤就是筛选，为了得到一个高效抗体往往要一次性准备8块甚至是10块融合的细胞培养板，作为医药用途的筛选甚至要用到100块板子,目前普通实验室应用最为广泛的筛选的方法仍然是常见的ELISA方法：将特异性的抗原包被ELISA酶标板，封闭后，将待检的细胞培养板里面的细胞培养上清吸取后加入到ELISA酶标板里面，37℃反应一个小时，洗板3次，再加入适当浓度的HRP（辣根过氧化物酶）标记的羊抗小鼠，37℃反应一个小时，洗板5次,加入底物反应显色，目测显色情况或者通过酶标仪读取OD值，判断阳性ELISA酶标板孔对应的细胞板孔。在这个过程中，从细胞培养板吸取上清检测需要大量的重复工作，稍不留神就会搞错，为了防止交叉污染，每个吸头只能使用一次，每检测一块板子需要1盒无菌吸头。如果需要检测的细胞培养板比较多，则需要使用大量的无菌吸头，这种操作方法存在以下问题：（1）大量使用无菌吸头会增加成本消耗；（2）由待检的细胞培养板里吸取上清并滴加至ELISA板上的过程需要一个孔一个孔的进行，这种滴加过程使得操作变成复杂、不断重复的操作，容易出现人为误差，通常滴加一块96孔的ELISA酶标板需要3-6分钟，费时费力；（3）无论如何小心的保证无菌操作，由于滴加过程复杂，使得无菌的可靠性较差，容易造成 人为误差，存在污染的危险。 

发明内容

本实用新型的目的是为了解决上述技术问题，提供一种可以进行单克隆抗体杂交瘤的高通量的筛选、工作简单、工作量小、成本低,适合大规模筛选的单克隆抗体杂交瘤的高效筛选盖板。 

本实用新型还提供一种包括了所述高效筛选板的单克隆抗体杂交瘤的高效筛选盒。

一种单克隆抗体杂交瘤的高效筛选盖板，包括盖板，所述盖板上设有检测齿。 

所述检测齿为包被有二抗或抗原的检测齿。 

一种单克隆抗体杂交瘤的高效筛选盒，包括盖板和底盒，所述盖板上设有检测齿，所述底盒上设有与检测齿对应的检测孔。 

所述检测齿为包被有二抗或抗原的检测齿，所述检测孔为经过对蛋白超低吸附处理的检测孔。 

所述检测齿与检测孔底部和侧壁均保持有间隙。 

底盒的侧壁和/或检测孔的内壁上标有指示线。所述指示线包括洗涤线、封闭线和包被线。 

本实用新型通过在盖板上设计检测齿，利用齿孔对应的关系，通过预先在检测齿上包被二抗或抗原，从而在进行单克隆抗体的筛选检测时，直接将检测齿插入待检的细胞培养板的孔中，使检测齿浸泡在细胞培养液中，使抗原抗体进行结合反应，然后再进行洗涤，之后将检测齿浸入合适浓度的酶标记抗原或酶标记的羊抗小鼠，洗涤后，将检测齿浸入装有酶对应底物的ELISA酶标板孔，如果待检细胞孔为阳性，检测齿上会结合酶，酶会催化底物反应，反应结束后，弃掉检测盖板，终止酶催化反应，将ELISA酶标板放在相应的酶标仪上上读取数值。本实用新型的反应操作原理与现有的ELISA法相同。作为产品，检测齿可根具体的需求包被二抗或抗原后再出售；也可不包被二抗或 抗原而直接作为产品销售，再由购买的客户根据需要自行包被二抗或抗原。这样，彻底取代了过去将待检的细胞培养板里面的细胞培养上清吸取后加入到ELISA酶标板的操作步骤，大大简化了操作难度、缩短了操作时间，减少了无菌吸头的使用量，使无菌操作更为可靠。 

所述检测齿的数量及位置可根据实际检测需要及对应的细胞培养板及酶标板的孔数及位置设计，在此不作限定。 

作为单克隆抗体杂交瘤的高效筛选盒，除含有上述设有检测孔的盖板外，还包括有对应的底盒，所述底盒在出售时可与盖板配合便于封装，保持无菌；在购入后进行包被抗原或二抗操作时，可在检测孔中装入含相应抗原的包被液及封闭液对检测齿进行包被及封闭操作。在进行筛选检测时，又可以加入洗涤液对检测齿进行洗涤，最后还可以将底物装入检测孔，将检测齿浸入底物液催化底物反应。由于底盒和盖板的齿孔对应，因此无需进行另外准备对应的有孔板。 

所述检测齿与检测孔底部和侧壁均保持有间隙,并且检测齿的位置、长度还应保证与对应的细胞培养板及酶标板上孔的配合，也要避免检测齿触碰到孔的底部和壁面，优选底盒上检测孔与细胞培养板及酶标板上孔的布置位置及深度一致。