[实用新型]一种同时检测三种真菌毒素的印刷电极免疫传感器

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种同时检测三种真菌毒素的印刷电极免疫传感器的制备。属于纳米功能材料、生物传感、食品安全分析和电化学分析技术领域。

背景技术

玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇均属于真菌毒素。真菌毒素是真菌产生的次级代谢产物，通常存在于霉变的谷物中，一旦通过食物链进入人体后，将可能造成致畸、致突变和致癌等严重危害，因此在全球食品安全问题中备受关注。

目前，真菌毒素的检测一般采用高效液相色谱法或酶联免疫吸附法，前者检测灵敏度高，但样品前处理烦琐、操作复杂、时间长，所需设备较昂贵；后者操作简便、快速，但每次只能完成一种真菌毒素的检测。因此，具有高通量优点的多通道传感技术将是真菌毒素快速检测的发展趋势。

本实用新型采用三通道丝网印刷电极免疫传感器同时检测玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇，与其它检测方法相比，具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、检测效率高等优势，可实现玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的同时检测。

实用新型内容

本实用新型的技术方案是：

1. 一种同时检测三种真菌毒素的印刷电极免疫传感器，其特征在于，在聚对苯二甲酸二乙酯（PET）基板上，设置有电极条、电极触点、辅助电极、3个工作电极、参比电极和敏感池；印刷绝缘浆，使工作电极区域有一凹槽，制得三通道丝网印刷电极。

2. 如上所述，辅助电极和工作电极为碳油墨印刷制成；参比电极为银/氯化银混合油墨印刷制成，在3个工作电极上设置有磁性石墨烯层和不同真菌毒素的抗体层，制得三通道丝网印刷电极免疫传感器。

所述不同真菌毒素是玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇。

所述电解池凹槽为一多边形凹槽，放置含有铁氰化钾的PBS缓冲溶液。

本实用新型具备以下优势：

（1）本实用新型采用磁性石墨烯具有良好的生物相容性，用来提高抗体固载量，增强电子传递能力。

（2）本实用新型传感器利用抗原抗体的特异反应，选择性好。

（3）本实用新型传感器检测方法简单、快速，易于推广。

（4）本实用新型传感器与现有技术相比，具有成本低、易于商品化的优点。

（5）本实用新型制备的三通道丝网印刷电极免疫传感器，可实现对玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速同时测定，显著提高了检测效率。

附图说明

图1为三通道丝网印刷电极六层网版的设计图纸。

图2为三通道丝网印刷电极结构图。

图2标号说明：1、电极条，2、电极触点，3、辅助电极，4、工作电极，5、参比电极，6、敏感池，7、绝缘层，8、电解池凹槽。

具体实施方式

下面结合附图和实施例进一步说明本实用新型。

实施例1  三通道丝网印刷电极的制备

本实用新型结合图1和图2，进行印刷电极的制备，整个印刷电极在厚度为0.5mm、长度为40mm、宽度为20mm的PET板。

制备步骤如下：

（1）在PET基底上印刷导电银浆（ED-479SS，美国埃奇森公司）制成的电极条1和电极触点2，100℃热固化12h。

（2）印刷导电碳油墨（ED-423SS，美国埃奇森公司）制成辅助电极3，100℃热固化12h。

（3）印刷导电碳油墨制成工作电极4，100℃热固化12h。

（4）印刷银/氯化银混合油墨（美国埃奇森公司）制成参比电极5，100℃热固化12h。

（5）印刷绝缘油墨（ED-452SS，美国埃奇森公司）制成敏感池6，紫外光固化30s。

（6）印刷绝缘油墨（ED-452SS，美国埃奇森公司）覆盖中间导电部分，制成绝缘层7和电解池凹槽8，紫外光固化30s，制得三通道丝网印刷电极。

热固化温度和时间由商业油墨提供的油墨固化信息要求决定。

实施例2  本实用新型传感器的制备及应用

（1）取一片实施例1制备的三通道丝网印刷电极，用超纯水冲洗，去掉电极表面的其他物质；在3个工作电极表面分别设置一层磁性石墨烯，晾干，制成磁性石墨烯层；

（2）在上述3个工作电极表面上分别制成一层玉米赤霉烯酮抗体、一层黄曲霉毒素B1抗体和一层脱氧雪腐镰刀菌烯醇抗体，晾干，制成三种不同真菌毒素的抗体层，

（3）用牛血清白蛋白封闭电极上非特异性的活性位点，制得一种同时检测三种真菌毒素的印刷电极免疫传感器，于4℃下保存备用。

（4）分别滴涂检测样品于工作电极上，保持电极湿润2h。

（5）在电解池凹槽内，加入含有铁氰化钾的PBS缓冲溶液，利用方波伏安法，同时检测样品中的玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量。