[实用新型]一种19-去甲睾酮胶体金免疫层析试纸卡

说明书

技术领域

本实用新型属于免疫化学检测技术领域，具体涉及一种19-去甲睾酮胶体金免疫层析试纸卡。

背景技术

19-去甲睾酮（19-Nortestosterone, NT），又名诺龙，是甾环结构上脱去第19位碳原子而形成的内源性和外源性蛋白同化激素，具有雄激素样性质和蛋白同化作用的功能。它被广泛地应用于治疗血液学疾病和手术后治疗，恶病质、黄体酮替换治疗，以及治疗人和动物的蛋白质缺陷型疾病，骨质疏松症和烧伤，甚至有潜在的避孕性能和改善阉割家禽骨骼的性能。由于具有很强的促蛋白质合成能力，参予生长发育的生理调节，增加瘦肉生长，减少脂肪贮积，进而提高饲料转化效率和经济效益，所以在食源性动物生产中也大量使用。运动员服用后可增强肌肉力量和体力，提高比赛成绩，所以也被违法应用到运动会和动物竞技比赛中。

19世纪七十年代末，一系列事故使人们认识到激素残留的危害。研究表明，19-去甲睾酮及其代谢物可造成肝脏黄疸、紫瘢性肝炎、肾上腺萎缩；还可引起低蛋白血症、血糖耐受性增加、男性精液稀少、女性月经周期不正常；以及內分泌失调、痤疮、毛发減少等。自从1986年以来，欧盟委员会就禁止在肉食性动物生产中以促进生长为目的使用人工合成的促蛋白同化激素，以避免消费者可能因食用激素的残留物或代谢物而引起的发育问题，神经问题，遗传毒性和癌症问题。我国农业部2002年4月发布的《食品动物禁用的兽药及其它化合物清单》中也明确规定性激素类原料药及其单方、复方制剂产品不准以抗应激、提高饲料报酬、促进动物生长为目的在饲养过程中使用。

然而食源性动物生产中使用19-去甲睾酮的案例在欧洲被大量报道，兽药监测也表明，中国的养殖场中激素仍被非法应用于动物生产过程中。这就要求对食源性动物进行严格的激素滥用监控，以保护消费者的合法权益。激素残留常用的检测方法有高效液相色谱法（HPLC），气相色谱－质谱法（GC-MS）和液相色谱－质谱法（LC-MS）等。这些方法灵敏度高，定性准确，可以确定化合物的分子量、分子式，甚至官能团，适合定量检测19-去甲睾酮及其代谢物。但这些方法成本高，需要专业的技术人员，昂贵的实验仪器及长时间的前期准备工作。而免疫学检测方法建立在抗体对抗原的分子识别上，其主要优点是抗原抗体的亲合力高、检测快速、经济实用，能够实现对生物液体的小体积、大通量检测，是最灵敏的方法之一。

胶体金标记免疫分析法是近年来迅速发展的一种新型分析技术，其特点是简便快速、成本低、无污染、无需培训，非常适合于现场检测。与ELISA相比，具有样品前处理简单，显色时间短（3-5 min），且所有试剂包含在一根试纸条上，无需使用仪器等优点，具有广阔的市场前景和应用价值。因此，研制快速、灵敏、高效的19-去甲睾酮胶体金免疫层析试纸卡对于保障动物性食品安全具有十分重要的意义。本项目也得到2012年度国家自然科学基金项目 （U1204310）资金支持。

发明内容

本实用新型解决的技术问题是提供了一种操作简单、快速准确、灵敏度高、成本低、稳定性好，可进行批量检测的19-去甲睾酮胶体金免疫层析试纸卡。

本实用新型的技术方案是：一种19-去甲睾酮胶体金免疫层析试纸卡，其特征在于：所述的19-去甲睾酮胶体金免疫层析试纸卡包括塑料盒体和封装于塑料盒体内的试纸条，所述的试纸条的底层为支撑层，该支撑层上由左到右依次附着有紧密相连的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述的塑料盒体上开有加样孔和观察窗，该加样孔的位置与试纸条上的样品垫位置相对应，观察窗与试纸条上的硝酸纤维素膜位置相对应，所述的硝酸纤维素膜上有19-去甲睾酮－载体蛋白偶联物溶液印制的检测线（T线）和羊抗鼠IgG溶液印制的质控线（C线），两者间距5 mm，其中19-去甲睾酮－载体蛋白偶联物溶液印制的检测线（T线）位于靠近样品垫的一侧，所述的结合垫上灌注有胶体金标记的抗19-去甲睾酮单克隆抗体。

本实用新型所述的支撑层是由聚氯乙烯树脂与稳定剂及辅料配合制成的PVC板。本实用新型所述的吸收垫是由吸水能力极强的植物长纤维为原材料制成的纯白滤纸。本实用新型所述的样品垫和金标抗体结合垫是由玻璃纤维棉制作而成的。本实用新型所述的样品垫和金标抗体结合垫的叠压宽度为2 mm，吸收垫与硝酸纤维素膜的叠压宽度为2 mm。本实用新型所述的样品垫、金标抗体结合垫和吸收垫上方覆盖有胶膜保护层。本实用新型所述的硝酸纤维素膜两端分界处有标记线。