[实用新型]一种大上样量的电泳凝胶制具有效
| 申请号: | 201320033876.7 | 申请日: | 2013-01-22 |
| 公开(公告)号: | CN203069432U | 公开(公告)日: | 2013-07-17 |
| 发明(设计)人: | 钱红;廖元明;白涛 | 申请(专利权)人: | 南京金斯瑞生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N1/34 | 分类号: | G01N1/34 |
| 代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 夏平;傅婷婷 |
| 地址: | 211100 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 大上样量 电泳 凝胶 | ||
技术领域
本实用新型属于生化实验设备领域,涉及一种大上样量的电泳凝胶制具,具体涉及一种用于制备聚丙烯酰胺凝胶制具的胶板和梳子,尤其涉及蛋白垂直电泳预制胶制具。
背景技术
聚丙烯酰胺凝胶电泳作为蛋白分析过程中最普遍、经典的应用,对整个生物技术产业的发展起着举足轻重的影响。
凝胶电泳时分离检测DNA、RNA、多肽和蛋白质等生物分子最广泛的应用。在凝胶这种具有三维网状孔径的支持物中,蛋白质等表面带有负电荷的生物有机分子在电场力的作用下向正极慢慢移动,大小、结构不同的分子移动速率不一样,彼此渐渐拉开距离,便于后期对其观察分析。
对于蛋白电泳的聚丙烯酰胺凝胶,实验室普遍的做法是即配即用。通常的步骤是使用一套玻璃板模具:前板、后板和一个梳子,用相应的夹具固定好,按照所需的配方配置好胶液,加入催化剂,灌入前后玻璃板之间的0.75mm或1.5mm厚其中0.75mm的最普遍的薄腔内,在上方插入梳子,静置若干个小时,胶液中的单体会聚合成三维网状孔径结构的透明凝胶,拔出梳子,梳齿的位置会形成上样孔。把胶板取出,装入电泳槽中,在内槽外槽分别加入电泳缓冲液,在胶顶部的上样孔中加入蛋白样品,使用专用的电泳仪电源,连接正负极电源线,设置合适的电压或电流,蛋白样品在电场力的驱动下,会根据分子量大小、分子形态或带电荷量多少而呈现出不同的迁移速率,从而分离开来。待蛋白样品指示剂移动到接近胶的底部,即可停止电泳,取出进行染色观察或转膜印迹等后续实验操作。
自行制作凝胶占用了研究人员大量的宝贵时间,而且做出来的胶保质期通常只有1周,加上聚丙烯酰胺凝胶在聚合之前的单体是累积性神经毒素,不注意防护则会对人体产生危害。同时,由于玻璃板本身易碎、昂贵、无法形成特殊结构的胶等缺点,采用塑料材料代替玻璃板而做成预制胶变成了主流。国外的生物公司首先推出预制胶,以塑料板代替玻璃板,采用卡扣或超声波焊接等技术使前后板固定在一起。电泳完成后撬开胶板取出凝胶染色,胶板一次性使用,为研究人员免去制胶的麻烦,保质期大大延长。预制胶的需求量逐年增加。
在玻璃板中,蛋白质的电泳分离效果比较好,条带比较锐利,蛋白丢失不严重,为了取得更好的转膜效果,0.75mm的胶厚度显然比1.5mm的优秀。但是,使用塑料代替玻璃之后,由于没有了玻璃对蛋白分离特有的理化特性,条带会稍微模糊一些,某些蛋白会有所丢失,为了弥补这一缺陷,只有增加胶的厚度来增加蛋白可上样量,所以市面上主流的胶厚度为1.0mm。当然,为了进一步增加上样量,1.5mm厚的胶也较多使用。但随着这一面的优势增加,另一面的劣势便凸显,越厚的胶越难以转膜。美国某公司在2012年推出了一款新预制胶,该预制胶的胶板改变了常规的前后板均为平直的结构,使前板向前倾斜突出,在上样孔的位置,可以看到梳子的齿形是前面倾斜、后面平直的梯形或楔形结构。梳齿的底部仍为1.0mm,符合胶板内部主要空间的厚度,梳齿往上,厚度随着斜面渐渐增加,使形成的上样孔为类“V”形的结构,达到了提高上样量的目的。
实用新型内容
本实用新型的目的是针对现有技术的上述不足,提供了一种更为理想的大上样量的电泳凝胶制具。
一种大上样量的电泳凝胶制具,包括前板、后板和梳子,所述的前板:其外表面为一平面,前板的内表面分为三段,分别为内表面上端的前板降面、前板主体面,以及连接前板降面与前板主体面的前板斜面,前板降面与前板主体面不在同一平面上且均平行于前板的外表面,其中前板降面与前板的外表面间的厚度薄于前板主体面与前板的外表面间的厚度;所述的后板:其外表面为一平面,后板的内表面分为三段,分别为内表面上端的后板降面、后板主体面,以及连接后板降面与后板主体面的后板斜面,后板降面与后板主体面不在同一平面上且均平行于后板的外表面,其中后板降面与后板的外表面间的厚度薄于后板主体面与后板的外表面间的厚度。
所述的前板还包括用于在凝胶上形成特定标记形状的半圆凸起结构,位于胶板底部中央的凸起,两边共有4个用于固定前后板相对位置的定位孔,还有用于加大底部焊接面积的“L”形结构。
所述的后板降面中部位置有横凹槽。
所述的横凹槽为贯穿后板降面左右的横凹槽,或为不连续的若干段凹槽或凹坑。
所述的后板还包括4个与前板定位孔对应的定位点。
所述的前后板拼焊接起来后,前、后板的降面之间形成的一个增大了的腔体的宽度比前、后板主体面之间形成的主体腔体的宽度大。
梳子的梳齿厚度与增大了的腔体的宽度一致。
梳子的每个梳齿正面为根部较宽、底部较窄的等腰梯形。
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