[实用新型]甲胎蛋白快速定量免疫层析检测试剂盒

说明书

本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种以胶体金免疫层析法制备的甲胎蛋白快速定量免疫层析检测试剂盒。

甲胎蛋白是一种糖蛋白，英文缩写AFP。正常情况下，这种蛋白主要来自胚胎的肝细胞，胎儿出生约两周后甲胎蛋白从血液中消失，因此正常人血清中甲胎蛋白的含量尚不到20微克/升。

但当肝细胞发生癌变时，却又恢复了产生这种蛋白质的功能，而且随着病情恶化它在血清中的含量会急剧增加，甲胎蛋白就成了诊断原发性肝癌的一个特异性临床指标。甲胎蛋白是诊断原发性肝癌的特异性肿瘤标志物，具有确立诊断、早期诊断、鉴别诊断的作用。(1)肝细胞再生时期，AFP在血液中呈阳性，急、慢性肝炎、肝硬化时会有肝细胞再生，因而AFP在血液中的浓度升高。(2)某些胚胎癌、生殖细胞瘤、某些消化道癌症等，血液中的AFP也有不同程度升高。 (3)妊娠妇女的AFP可有不同程度的升高。(4)最值得注意的是肝癌，其血液中的AFP可明显增高，并且是持久性的升高。这是由于肝癌的癌细胞能合成或分泌较多的AFP释放入血的缘故。正因为如此，医生们就把检测人体血液中的AFP作为诊断肝癌的重要依据，并把AFP称为“肝癌标志物”。检测AFP是诊断肝癌的一种简便、灵敏、快捷的方法，现认为它在发现早期肝癌方面有独一无二的价值，用AFP诊断肝癌的“专一性”仅次于病理学检查。 

目前常用化学发光法、酶标法、酶标电泳法、放射免疫法检测。一般认为：定性法阳性或定量>400毫微克/毫升、>200毫微克/毫升，持续8周，而谷丙转氨酶（SGPT）正常，并排除妊娠和生殖腺胚胎瘤，原发性肝癌的诊断确立。特别应用在早期亚临床肝癌的诊断并及时手术可大大提高患者的存活率。对肝癌手术、化疗、中西医结合治疗、放疗等疗效及预后判断、动态测定血清甲胎蛋白有其重要的临床价值。 　　

　  放射免疫电泳甲胎蛋白AFP正常值：≤25μg/L　放射免疫分析AFP正常值：≤20μg/L　酶联免疫法AFP正常值：≤25μg/L 最常用的定量试验为放射免疫法（正常值为0～25ug/L），若超过25ug/L为阳性，若再25～400 ug/L之间为低浓度阳性，超过400ug/L即为高浓度阳性。 

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试剂的NC膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在NC膜上层析，再被包被抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测T线，在一定的条件下，T线的强弱和样品中的浓度呈正相关或负相关，从而实现检测。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。

本实用新型的目的是提供甲胎蛋白快速定量免疫层析检测试剂盒，具有全程定量或半定量检测能力，操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。

甲胎蛋白快速定量免疫层析检测试剂盒，其特征在于试剂盒由试纸卡、比色卡和胶体金定量读数仪构成。

所述试纸卡结构为：在塑料底板(1)一端粘贴上样垫(2)，上样垫的一端紧密压接含有标记抗人甲胎蛋白特异性抗体的胶体金垫(3)，胶体金垫一端紧密压接硝酸纤维素NC膜(4)，NC膜上包被有相互分离的检测线T(5)和质控线C（6），检测线为和标记抗体配对的AFP抗体，质控线为抗鼠IgG抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(7)形成试纸，试纸装入塑料卡内形成试纸卡。

所述试纸卡结构为：在塑料底板(1)一端粘贴上样垫(2)，上样垫的一端紧密压接含有标记抗人甲胎蛋白特异性抗体的胶体金垫(3)，胶体金垫一端紧密压接硝酸纤维素NC膜(4)，NC膜上包被有相互分离的检测线T(5)和质控线C（6），检测线为和标记抗体配对的AFP抗体，质控线为抗鼠IgG抗体，硝酸纤维素膜的另一端连接吸样垫(7)形成试纸，试纸装入塑料卡内形成试纸卡。

所述试纸卡的抗体为高敏AFP配对抗体，分别识别AFP不同表位，抗体可以为纯化的单克隆抗体或多克隆抗体。

所述试纸卡的NC膜为孔径8‑12微米的多孔样结构膜，上样垫为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫由吸水滤纸构成。

所述比色卡是白色背景上印有系列不同深浅红色线条的纸板，用于对检测结果的对比判定。不同深浅的红色线条共6条，分别对应600、400、200、100、50、25ng/ml的AFP浓度。

所述胶体金定量读数仪是一种光学检测系统，用于对检测结果的定量判定，对AFP的检测范围为0‑600ng/ml。