[发明专利]双孢菇液体菌种及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于食用菌液体菌种技术领域，特别是涉及食用菌中的双孢菇液体菌种及其该液体菌种的制备方法。

背景技术

在双孢菇的生产过程中所用的菌种有固体菌种和液体菌种。目前食用菌双孢菇通常采用传统的固体菌种栽培模式，培育双孢菇菌种多以麦粒为原料，是将一级PDA试管斜面母种接到麦粒培养基中制成二级固体菌种，再将二级种扩繁制成三级固体菌种，在实际生产中存在生产周期长，制作成本高；污染率高，菌龄长，出菇不整齐，不一致等缺点。固体菌种从接种到菌丝长满瓶，一般需要35-40天，固体菌种往往是瓶底的菌丝刚萌动，其表层菌丝就已老化，因此出菇不齐。采用液体菌种具有生产周期短，流动性好，生命力旺盛，发菌快、生物转化率高、菌种纯度高等优势，有利于机械化操作等优点，是规模化生产发展的重要方向之一。但目前双孢菇液体菌种培养基仍然存在着制备成功率低、菌丝生长不适应，在培养后期容易出现菌丝老化退变等问题，且操作专业技术要求高，在大规模生产过程中，会直接影响双孢菇的培育质量与产量。

发明内容

本发明目的是克服上述现有技术存在的诸多缺陷，提供一种双孢菇液体菌种及其该液体菌种的制备方法。

本发明所解决的技术问题提出如下技术方案来实现：一种双孢菇液体菌种，是由各固体组份与液体组份组成，其特征在于：一种双孢菇液体菌种，是由各固体组份与液体组份组成，其特征在于：该双孢菇液体菌种是由斜面培养基、摇瓶培养基和发酵罐培养基经三级扩繁培养制得，所述的扩繁培养中各级培养基的重量组成是：

1)斜面培养基的组成：每1000毫升水中所添加各组份的重量为：

马铃薯100～200g，牛粪50～150g，葡萄糖10～30g，磷酸二氢钾1～2.5g，硫酸镁0.5～2g，蛋白胨1～4g，琼脂15～25g，pH自然；

2)摇瓶培养基的组成：每1000毫升水中所添加各组份的重量为：

马铃薯100～200g，牛粪50～150g，玉米粉5～20g，麸皮5～20g，葡萄糖10～30g，磷酸二氢钾1～2.5g，硫酸镁0.5～2g，蛋白胨1～4g，维生素_B110～30毫克，pH自然；

3)发酵罐培养基的组成：每50升水中所添加各组份的重量份为：马铃薯2～4kg，牛粪1～3kg，麸皮0.5～1kg，玉米粉0.2～0.4kg，蔗糖0.5～1kg，磷酸二氢钾30～60g，硫酸镁20～30g，维生素_B120～50毫克，消泡剂40～50g，pH自然。

本发明优选各级培养基的重量组成是：

1)斜面培养基的组成：每1000毫升水中所添加各组份的重量为：

马铃薯200g，牛粪150g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁1g，蛋白胨2g，琼脂20g，pH自然；

2)摇瓶培养基的组成：每1000毫升水中所添加各组份的重量为：

马铃薯200g，牛粪150g，玉米粉10g，麸皮10g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾2g，硫酸镁1g，蛋白胨2g，维生素_B120毫克，pH自然；

3)发酵罐培养基的组成：每50升水中所添加各组份的重量份为：马铃薯2.5kg，牛粪1kg，麸皮0.5kg，玉米粉0.25kg，蔗糖0.5kg，磷酸二氢钾50g，硫酸镁25g，维生素_B130毫克，消泡剂50g，pH自然。

本发明制备双孢菇液体菌种的方法包括如下步骤：

1)活化菌种：将双孢菇原母种接入斜面培养基中，于23～28℃培养5～7天，制得斜面母种菌种片；

2)摇瓶液体菌种培养：装入瓶容量3/5的摇瓶培养基，于120±2℃灭菌30分钟，冷却后在接种箱接入0.4～0.5厘米斜面母种菌种片5～6片，使菌种片漂浮在液面上，于23～28℃在培养箱中静置培养60～72小时，然后于23～28℃，200r/min震荡培养5～8天，得到摇瓶液体菌种，其标准是：摇瓶摇动后有菌丝挂壁，检测培养液菌丝球单位密度达到指标的80％以上即可使用；