[发明专利]一种决明子多糖定量检测方法

权利要求书

1.一种决明子多糖定量检测方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）粉碎：将待测决明子进行粉碎，过20～80目筛得决明子粉料，干燥后备用；

（2）脱脂去色：用丙酮浸泡决明子粉料，振摇30min后，静置30min，倒去上层清液；重复该步骤至上层清液无色后，固液分离得脱脂粉料；

（3）热水提取：用80～100℃热水对脱脂粉料进行提取1～3小时，合并滤液获得提取液；

（4）纯化处理：

a.聚乙烯聚吡咯烷酮处理：按0.5～5g/100mL的浓度往步骤（3）的提取液中加入聚乙烯聚吡咯烷酮，慢速搅拌1～3小时后，过滤，合并滤液；将滤液加入去离子水，定容，得待测样品液；或，

b.聚乙烯聚吡咯烷酮/醇沉处理：按0.5～5g/100mL的浓度往步骤（3）的提取液中加入聚乙烯聚吡咯烷酮，慢速搅拌1～3小时后，过滤，合并滤液；加入相当于滤液3倍体积的无水乙醇，室温静置4小时，离心后取沉淀物；往沉淀物加入去离子水复溶，定容，得待测样品液；

（5）测定：以混合单糖标准样品建立标准曲线，以苯酚-硫酸法测定待测样品液的多糖浓度，即为待测决明子的多糖浓度；

所述混合单糖标准样品是由混合单糖配制而成，所述混合单糖包括摩尔百分数90%以上的甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖；甘露糖、葡萄糖、半乳糖和木糖的摩尔比例为43:8:21:19。

2.根据权利要求1所述的决明子多糖定量检测方法，其特征在于：步骤（1）所述的干燥后备用是将决明子粉料在60℃下干燥6小时，然后置于干燥器中备用。

3.根据权利要求1所述的决明子多糖定量检测方法，其特征在于：步骤（2）所述的决明子粉料与丙酮的料液重量比为1:（15～30）。

4.根据权利要求1所述的决明子多糖定量检测方法，其特征在于：步骤（3）所述的脱脂粉料与热水的料液比为1:（20～35）（g/mL）。

5.根据权利要求1所述的决明子多糖定量检测方法，其特征在于：步骤（5）所述混合单糖在配成混合单糖标准样品前先于102℃烘干至恒重后备用。

6.根据权利要求1所述的决明子多糖定量检测方法，其特征在于：步骤（5）所述混合单糖还包括葡萄糖醛酸、氨基半乳糖和阿拉伯糖；所述甘露糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖的摩尔比为43:4:1:8:21:19:5。

7.根据权利要求1所述的决明子多糖定量检测方法，其特征在于：步骤（5）所述的苯酚-硫酸法包括如下步骤：取1mL待测样品液加入具塞试管中，加入质量分数5%的苯酚溶液2mL，混匀，缓慢加入7mL浓硫酸，混匀，沸水浴15min，取出，冰水冷却至室温，在490nm处测定吸光值；根据吸光值及标准曲线确定样品液浓度。