[发明专利]一种快速批量靶向化筛选生物柴油微藻的方法及系统

权利要求书

1.一种快速批量靶向化筛选生物柴油微藻的方法，包括以下步骤：

1）采集含有藻类的酸性废水水样；

2）对步骤1）采集到的废水水样进行富集培养，获得富集水样；富集培养的条件为：温度10～40℃，光照强度2500～20000lux，光照时间为8～24h/天，通气量0.1～1vvm，其中CO₂体积分数为0.03～50%，富集培养时间为8～20天；

3）对步骤2）的富集水样进行梯度稀释，并将稀释后的富集水样点到BG11固体培养基平板上，进行平板培养；平板培养的条件为：10～40℃，光照强度2500～20000lux，光照时间为8～24h/天，平板培养时间为8～15天；

4）步骤3）的平板培养结束后，挑取固体培养基平板上长出的单个微藻藻落于载玻片上制备微藻细胞的临时装片，采用苏丹黑B亲脂性染料进行染色，在光学显微镜下观察，与含油参照微藻藻株进行比较，选择细胞中黑色油滴的面积较参照株细胞中黑色油滴面积更大的微藻细胞，即为目标微藻。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）所述酸性废水水样的pH值为3.0～6.5。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）所述富集培养的条件为：温度25～35℃，光照强度6000～9000lux，光照时间为9～18h/天，通气量0.2～1vvm，其中CO₂体积分数为10～20%，富集培养时间为10～15天。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3）所述梯度稀释为采用灭菌后的BG11液体培养基将富集水样稀释10¹～10⁷倍。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3）中所述富集水样点到固体培养基平板上时，每次点样量为1～50微升稀释的富集水样。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4）所述苏丹黑B亲脂性染料中，溶质为0.6wt%的苏丹黑B，溶剂为95v/v%乙醇水溶液，染色温度为100℃，染色时间为10min。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4）中所述含油参照微藻藻株为Chlorella pyrenoidosa SJTU-2。

8.权利要求1-7任一权利要求所述的方法在生物质能源领域的应用。

9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述应用为权利要求1-7任一权利要求所述的方法在生物柴油生产领域的应用。