[发明专利]抵抗猪伪狂犬病毒增殖的重组蛋白及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种抵抗猪伪狂犬病毒增殖的重组蛋白，该重组蛋白在合成用于抵抗猪伪狂犬病毒的药品中应用。

背景技术

伪狂犬病（Pseudorabies，PR）最早在1813年美国的牛群中发现，病牛的临床症状表现为极度瘙痒，所以本病也叫“疯痒病”。1902年，匈牙利科学家Aujeszky首先分离出了该病毒，故PR又名奥耶斯基氏病（Aujeszky's disease，AD）。1934年，Sabin和Wright经实验认证该病毒是疱疹病毒，后来命名为猪疱疹病毒（SHV-1）或伪狂犬病毒（Pseudorabies virus，PRV）。蛋白质测序分析表明，PRV与马疱疹病毒（EHV-1）、牛疱疹病毒（BHV-1）、和水痘病毒（VZV）同源性很高。PRV的宿主包括除高等灵长动物和人以外的其它哺乳动物以及脊椎动物，猪是PRV感染后可以唯一存活的动物，因此，猪是PRV的贮存宿主（KretzschmarC.Die Aujeszkysche Krankheit:Diagnostik,Epizootiologie und Bekaempfung.Jena:Fischer,1970）。

PRV遍布世界各国，是典型的极难防疫的自然疫源性疾病，被列为畜牧业和养猪业的第三大疫病，世界动物卫生组织（OIE）将本病列为B类疾病，我国也将其列为二类传染病。PRV可以感染多种动物，以猪和牛最为严重。临床症状的严重程度由感染途径、感染病毒的毒力、猪只的年龄决定。新生仔猪感染后表现为中枢神经系统症状、发热、呼吸困难等，出现中枢神经系统的猪一般在症状发生后24～36h后死亡，仔猪的死亡率很高，可达100%。断奶仔猪（3～6周龄）、幼龄断奶猪临床症状和新生仔猪相似，但是中枢神经症状不经常出现，死亡率一般低于50%。生长猪、育肥猪感染PRV后最常见症状是呼吸症状，无继发症时，死亡率为1%～2%。成年母猪和公猪感染后主要是呼吸症状。PRV可以通过胎盘屏障，感染胎儿，导致死亡。成年猪感染PRV的死亡率很少超过2%（Kluge J,Beran G,Hill H and Platt K.Pseudorabies(Aujeszky's disease).Diseases of swine,1999,8(233-246.)。

目前该病的预防主要通过疫苗免疫，其中有效的疫苗包括弱毒疫苗和基因工程基因缺失疫苗。弱毒疫苗是野毒株在异常的条件下培养，通过反复传代获得，其基因内部有多处点突变或一些基因的缺失，是一种天然的基因缺失疫苗，具有良好的免疫原性，价格也比较低廉。最常使用的弱毒疫苗是匈牙利Bartha-K61株和罗马尼亚BUK株。对这两株弱毒疫苗的核苷酸序列分析发现，Bartha-K61株在其基因组中存在多处突变，在US区有整个gE基因和US9及部分gI和US2的缺失，在UL区gC基因、gM基因和ULZI还存在点突变，Bartha-K61株安全性和免疫原性良好，现在仍然在许多国家使用。对BUK株基因组分析表明，在US区绝大部分gE基因发生缺失。除了以上两个弱毒株外，应用比较广泛的毒株还有Norden、GNKJ、MK-25、MK-35、NIA-4、Ercegovac和Alfort-26株等。弱毒疫苗效果较好，但是一些实施扑灭计划的国家已不允许使用弱毒疫苗，主要因为以下三个原因：

①其主要毒力基因TK仍然存在，毒力有可能返强；

②未经充分致弱或过度致弱的疫苗株不仅不能获得满意的免疫保护反应，反而可能引起疾病再次流行或者免疫抑制；

③弱毒疫苗仍可形成潜伏感染，并有散毒的可能，部分接种猪血清中存在中和抗体，但仍可排毒数年。