[发明专利]一种施氏假单胞菌KY-02与应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是一种施氏假单胞菌KY-02及其单克隆抗体与应用。

背景技术

环氧氯丙烷是一种重要的有机化工原料和精细化工产品，在环氧化合物中，其产量仅次于环氧乙烷和环氧丙烷。它是无色液体，有似氯仿气味，易挥发，不稳定，能与乙醇、乙醚、氯仿、三氯乙烯和四氯化碳等混溶，不溶于水，不能与石油烃混溶。它在工业生产中有广泛的用途，主要用于制备甘油、环氧树脂、氯醇橡胶、聚醚多元醇，是生产甘油及缩水甘油衍生物的重要原料，可用作有机溶剂（树脂、树胶、纤维素酯、纤维素醚等的溶剂），还是杀鼠剂鼠甘伏的中间体。

然而，环氧氯丙烷为国家首批重点监管危险化学品之一：其蒸气对呼吸道有强烈刺激性，反复和长时间吸入能引起肺、肝和肾损害，高浓度吸入致中枢神经系统抑制可致死；其蒸气对眼有强烈刺激性，液体可致眼灼伤；皮肤直接接触液体可致灼伤；口服引起肝、肾损害，可致死；长期少量吸入可出现神经衰弱综合征和周围神经病变；小鼠皮下实验显示，最小中毒剂量720mg/kg时就可以导致肿瘤阳性。它在空气中的容许量为2ppm，其蒸气可与空气形成爆炸性混合物，遇明火、高温能引起分解爆炸和燃烧；若遇高热可发生剧烈分解，引起容器破裂或爆炸事故。

尽管环氧氯丙烷对人类和环境有着上述诸多危害，但随着工业生产的发展，还是有大量的环氧氯丙烷被排放到工业废水中。这不仅提高了处理负荷，增加了处理难度，同时还可能使现有的活性污泥系统中毒甚至崩溃。

普通微生物和活性污泥都很难实现环氧氯丙烷的有效降解。因此，目前针对环氧氯丙烷废水的处理方法多集中于Fenton试剂氧化处理法等化学方法。乐向辉于2008年报道了使用Fenton试剂氧化处理法对环氧氯丙烷人工废水的处理案例，确定了当初始pH值为3、添加亚铁离子和过氧化氢分别为1.60g/L和1.92g/L时，COD可降低89.44%。李小林于2009年报道了采用单因素和正交试验方法考察了反应温度、pH值、反应时间、FeSO₄和H₂O₂投加量等因素对去除率的影响，优化条件后去除率为60%左右。陈新德于2012年报道了针对某氯碱厂在环氧氯丙烷生产过程中环化塔塔底排出废水的化学法处理，优化条件后，CODCr去除率可达90.4%。

然而，化学方法并不能获得理想的去除效率，而且需要投加大量的药剂，成本较高，还容易造成二次污染。因此，筛选获得能够高效降解环氧氯丙烷的菌株，成为工业污水处理领域亟待解决的难题之一。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种施氏假单胞菌KY-02，具有极强的降解环氧氯丙烷能力。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供上述施氏假单胞菌KY-02的应用。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)KY-02，其保藏号为CGMCC No.8526（保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号、保藏日期：2013年12月9日、保藏编号：CGMCC No.8526）。

优选的，上述施氏假单胞菌KY-02，分离自活性污泥，在筛选平板上表现为白色边缘整齐、湿润粘稠，革兰氏染色呈阴性；通过16SrDNA和Biolog微生物分类鉴定系统鉴定，确定为施氏假单胞菌，命名为施氏假单胞菌KY-02，其系统进化树如图1所示，16SrDNA序列分析结果为序列表中<400>1所示序列。

优选的，上述施氏假单胞菌KY-02，所述核苷酸序列为细菌16S rDNA片段的V3可变区和V8-V9可变区。

优选的，上述施氏假单胞菌KY-02，具有极强的降解环氧氯丙烷能力。

上述施氏假单胞菌KY-02，在降解工业废水中环氧氯丙烷方面的应用。

优选的，上述施氏假单胞菌KY-02的应用，将所述施氏假单胞菌KY-02菌株接种至LB培养基中，30℃振荡培养至菌浓为O.D₆₀₀≈2.0，以1-5%的接种量接种于含环氧氯丙烷的废水中，20-30℃培养1-3天，维持溶氧在3.0ppm以上，实现对环氧氯丙烷的降解。

本发明的有益效果是：