[发明专利]毒杀芬单体的分离和测定方法

说明书

技术领域

本发明属于农副产品或食品检测领域，涉及农药残留的检测，具体地，涉及毒杀芬单体的分离和测定方法。更具体地，本发明涉及一种测定烟草中毒杀芬单体的方法，特别涉及一种能分别或者同时测定烟草中毒杀芬单体的方法。

背景技术

毒杀芬（Toxaphene）是一种以松节油为主要原料合成的有机氯类农药，自1972年美国环保署颁布滴滴涕禁令后，毒杀芬使用量迅速增长并成为美国乃至世界范围内使用的主要杀虫剂，仅1970年到1993年间毒杀芬在全球的使用量就高达6.7×10⁵吨。

毒杀芬具有致畸、致癌、致突变等剧毒性，并且稳定性高、易于被生物体富集，故20世纪90年代后相继被各国禁止生产，并于2002年被列为《斯德哥尔摩公约》中12种首要控制的可持续有机污染物之一，许多国家和组织对其在食品中的最大残留限量做了严格规定，如德国规定毒杀芬在鱼中的最大残留限量为0.1mg／kg(以Parlar26、Parlar50、Parlar62这3种毒杀芬主要单体总残留量计)。欧盟规定Parlar26、Parlar50、Parlar62在水果、蔬菜和谷物中的最大残留限量均为0.1mg／kg。

虽然毒杀芬在全球已被禁用，但由于它稳定性高、半衰期长，目前仍滞留于土壤中。多年生根茎类中药材极有可能受其污染，而目前我国还没有毒杀芬在中药材中的残留检测标准。为保证人们用药安全，迫切需要建立灵敏、准确的中药材中毒杀芬残留量测定方法。

但是，毒杀芬成分极其复杂，仅其主要成分氯代冰片烷类化合物的数量从理论上推断就达32768种，实际所含化合物也至少有1000多种。

目前，毒杀芬残留检测多采用气相色谱-质谱法(GC-MS)，但是该方法但选择性不高，无法去除色素等样品基体干扰，而需要复杂的前处理过程来净化样品，例如采用硅藻土柱吸附去杂质，正己烷洗过。此外，GC-MS检测，无法将毒杀芬单体分离开，并且检测的是毒杀芬的总量。

然而，现有技术中检测的样品基质以土壤等环境样品和鱼等海产品居多，尚未见烟草中毒杀芬残留主要单体测定方法的报道。目前，尚需要一种能分别测定烟草中毒杀芬农残主要单体的方法，并且为推进毒杀芬的安全性评价提供技术支持。

并且实际上，不管使用何种方法，对于毒杀芬各种单体的有效逐一分离和测定，涉及的因素和条件诸多，故而是本领域始终未能真正解决的技术难题。

发明内容

本发明人经过深入的研究和创造性的劳动，得到了一种毒杀芬单体的分离（提取）和测定方法。本发明人惊奇地发现，所述方法能够将毒杀芬的单体逐一分离出来，并且能够有效地测定各个单体的浓度。由此提供了下述发明：

本发明的一个方面涉及一种从样品中分离毒杀芬单体的方法，其使用环己烷-丙酮溶液进行萃取，得到提取液。

在本发明的一个实施方案中，环己烷-丙酮溶液需要完全浸没样品。

在本发明的一个实施方案中，样品取1－10g，环己烷-丙酮溶液用量为20－100mL。

根据本发明的任一项所述的方法，其中，所述样品为农副产品或固态食品；具体地，为烟草原料或者烟草制品；更具体地，为烤烟、香料烟或白肋烟。

根据本发明的任一项所述的方法，其中，所述毒杀芬单体为选自Parlar26、Parlar50、Parlar62、Parlar40、Parlar42、Parlar44和Parlar32中的任意1、2、3、4、5、6或7种。

根据本发明的任一项所述的方法，其中，所述环己烷-丙酮溶液为环己烷与丙酮体积比9：1至4:1的环己烷-丙酮溶液。具体地，环己烷与丙酮体积比为9：1、8：1、7：1、6：1、5：1或4：1。优选地，环己烷与丙酮体积比为8：1至5：1，更优选为7：1至5：1，进一步优选为6.5：1至5.5：1，特别优选为6：1。

不拘于理论的限制，尽管毒杀芬能够溶于一些有机溶剂，但是，由于毒杀芬极性较弱，本发明人进行了深入的研究分析，其中还比较了环己烷、乙酸乙酯、环己烷及其不同配比的混合溶液，结果发现，特别是对于烟草样品，体积比为6：1环己烷-丙酮溶液的回收率高，干扰少。

根据本发明的任一项所述的方法，其还包括将提取液进行振荡和除去固体残渣的步骤。

根据本发明的任一项所述的方法，其中，所述振荡为涡旋振荡，所述除去固体残渣为过滤（优选使用0.45μm的滤膜）；优选地，所述涡旋振荡的时间为至少1分钟；更优选为至少5分钟；特别优选为至少10分钟；进一步优选为10－40分钟。