[发明专利]一种分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法

权利要求书

1.一种分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤S1：总核酸的获取，准备细胞裂解液，并利用有机溶剂将细胞裂解液中的蛋白质与脂类去除；

步骤S2：总RNA的分离，向步骤S1中的总核酸中加入氯化锂溶液，并在低温静置后采用离心的方法分离出总RNA，同时将上清液中的宏基因组DNA转移放置；

步骤S3：宏基因组DNA的沉淀，取出步骤S2中所转移放置的上清液，利用预冷的异丙醇或乙醇将上清液中的宏基因组DNA沉淀，并在低温静置后采用离心的方法分离出宏基因组DNA；

步骤S4：宏基因组DNA与总RNA的纯化，分别采用乙醇洗涤纯化步骤S2和步骤S3中获得的总RNA和宏基因组DNA，并分别采用离心的方法获得纯化后的总RNA和宏基因组DNA。

2.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S1中的有机溶剂为氯仿和异戊醇的混合液，并且氯仿和异戊醇的体积比为24∶1，所述有机溶剂的加入量与细胞裂解液的体积相等。

3.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S1中的总核酸体积若小于100μL，则核酸样品浓度在300-400ng/μL。

4.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S2中的氯化锂溶液为饱和溶液，并且氯化锂溶液的加入体积为总核酸溶液体积的0.25倍。

5.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S2中的低温静置条件具体为，首先在-20℃的温度下静置20min，然后在4℃的温度下静置6-8h。

6.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S2和S3中的离心条件具体为，在温度为4℃，离心力为12000×g下离心20min。

7.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S3中，所述异丙醇或乙醇的加入量为上清液体积的0.6倍，其低温静置条件具体为在-20℃的温度下静置30min。

8.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S4中的洗涤用乙醇为70％稀释液，其中的无水乙醇与水体积比为7∶3。

9.根据权利要求1所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述步骤S4中的离心条件为在离心力为10000×g的条件下室温离心15min。

10.根据权利要求1～9任一项所述的分离微生物宏基因组DNA与总RNA的方法，其特征在于：所述细胞裂解液为菌种样品或环境样品的细胞裂解液。