[发明专利]一种G6PD缺乏症基因检测膜条以及PCR引物有效

专利信息
申请号: 201310730702.0 申请日: 2013-12-26
公开(公告)号: CN103695554A 公开(公告)日: 2014-04-02
发明(设计)人: 陆小梅;黎四平;李文瑞;彭琪 申请(专利权)人: 东莞市石龙博爱医院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 东莞市华南专利商标事务所有限公司 44215 代理人: 卞华欣
地址: 523325 广东省*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 g6pd 缺乏 基因 检测 以及 pcr 引物
【权利要求书】:

1.一种G6PD缺乏症的基因检测膜条,包括基底膜条以及在所述基底膜条上固定有特异性的突变探针和正常对照探针,其特征在于:共包括20条突变探针型和13条正常对照探针,所述20种突变探针分别为:A95G、G392T、G487A、A493G、T517C、C519T、C519G、C592T、A835G、A835T、G871A、C1004T、C1004A、C1024T、C1311T、C1360T、G1376T、G1381A、C1387T、G1388A。

2.根据权利要求1所述的一种G6PD缺乏症的基因检测膜条,其特征在于:所述突变探针和正常对照探针的3’端或5’端带有氨基标记,所述突变探针的具体序列为:

A95G     GGATACACGCATATTCATCA

G392T    CTCCACCTGGTGTCACAG

G871A     AGGTCAAGATGTTGAAATG

C1004T   CACCACCGTCACTTTTGCA

C1004A CACCACCGACACTTTTGCA

C1024T    AGCCGTCGTCTTCTATGT

C1360T   GCACTTCGTGTGCAGGTGA

G1376T GAGCTCCTTGAGGCCTGG

G1381A GAGCTCCGTGAGACCTGG

C1387 A    CCTGGAGTATTTTCACCCC

G1388A CCTGGCATATTTTCACCCC

G487A     GCTCCCAGCAGAAGCT

A493G     CTGGGACCGCATCAT

T517C     CTCCCGAGGGGCTTC

C519T     CTCCCAAAGGGCTTCTC

C519G      CTCCCCAAGGGCTTCTC

C592T     ATCTACTGCATCGACCA

A835G     CGCCTCCGCCAACTCA

A835T     CGCCTCCTCCAACTCA

C1311T   TGACGCCTATGAGCGC;

所述正常对照探针的具体序列为:

95N GGATACACACATATTCATCA

392N   CTCCACCTGGGGTCACAG

871N   AGGTCAAGGTGTTGAAATG

1004N  CACCACCGCCACTTTTGCA

1024N  AGCCGTCGTCCTCTATGT

1360N  GCACTTCGTGCGCAGGTGA

1376/1381N   GAGCTCCGTGAGGCCTGG

1387/1388N    CCTGGCGTATTTTCACCCC

487/493N     CAGAGGCTGGAACCG

517/519N     CTCCCGAAGGGCTTCTC

592N       ATCTACCGCATCGAC

835N     CGCCTCCACCAACTCA

1311N      TGACGCCTACGAGCG。

3.根据权利要求1所述的一种G6PD缺乏症的基因检测膜条,其特征在于:所述基因检测膜条由以下方法制备而成:

a.  用打印机在基底膜条上打印位点阵列;

b.  用EDAC溶液浸泡打印后的膜条:将浸泡后的膜条置于水平摇床上轻摇浸泡30min,以活化膜条表面的羧基基团;

c.  分别用探针稀释液将33条探针稀释至5μmol/L;

d.  将探针点加在膜条相应位点上,探针上的氨基与膜条表面的羧基发生交联反应;

e.  待膜条干燥后,用0.1mol/L的NaOH溶液浸泡膜条5分钟,以封闭膜条表面未反应的羧基;

f.  纯水洗涤膜条,干燥后即可。

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