[发明专利]一种G6PD缺乏症基因检测膜条以及PCR引物有效
申请号: | 201310730702.0 | 申请日: | 2013-12-26 |
公开(公告)号: | CN103695554A | 公开(公告)日: | 2014-04-02 |
发明(设计)人: | 陆小梅;黎四平;李文瑞;彭琪 | 申请(专利权)人: | 东莞市石龙博爱医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 东莞市华南专利商标事务所有限公司 44215 | 代理人: | 卞华欣 |
地址: | 523325 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 g6pd 缺乏 基因 检测 以及 pcr 引物 | ||
1.一种G6PD缺乏症的基因检测膜条,包括基底膜条以及在所述基底膜条上固定有特异性的突变探针和正常对照探针,其特征在于:共包括20条突变探针型和13条正常对照探针,所述20种突变探针分别为:A95G、G392T、G487A、A493G、T517C、C519T、C519G、C592T、A835G、A835T、G871A、C1004T、C1004A、C1024T、C1311T、C1360T、G1376T、G1381A、C1387T、G1388A。
2.根据权利要求1所述的一种G6PD缺乏症的基因检测膜条,其特征在于:所述突变探针和正常对照探针的3’端或5’端带有氨基标记,所述突变探针的具体序列为:
A95G GGATACACGCATATTCATCA
G392T CTCCACCTGGTGTCACAG
G871A AGGTCAAGATGTTGAAATG
C1004T CACCACCGTCACTTTTGCA
C1004A CACCACCGACACTTTTGCA
C1024T AGCCGTCGTCTTCTATGT
C1360T GCACTTCGTGTGCAGGTGA
G1376T GAGCTCCTTGAGGCCTGG
G1381A GAGCTCCGTGAGACCTGG
C1387 A CCTGGAGTATTTTCACCCC
G1388A CCTGGCATATTTTCACCCC
G487A GCTCCCAGCAGAAGCT
A493G CTGGGACCGCATCAT
T517C CTCCCGAGGGGCTTC
C519T CTCCCAAAGGGCTTCTC
C519G CTCCCCAAGGGCTTCTC
C592T ATCTACTGCATCGACCA
A835G CGCCTCCGCCAACTCA
A835T CGCCTCCTCCAACTCA
C1311T TGACGCCTATGAGCGC;
所述正常对照探针的具体序列为:
95N GGATACACACATATTCATCA
392N CTCCACCTGGGGTCACAG
871N AGGTCAAGGTGTTGAAATG
1004N CACCACCGCCACTTTTGCA
1024N AGCCGTCGTCCTCTATGT
1360N GCACTTCGTGCGCAGGTGA
1376/1381N GAGCTCCGTGAGGCCTGG
1387/1388N CCTGGCGTATTTTCACCCC
487/493N CAGAGGCTGGAACCG
517/519N CTCCCGAAGGGCTTCTC
592N ATCTACCGCATCGAC
835N CGCCTCCACCAACTCA
1311N TGACGCCTACGAGCG。
3.根据权利要求1所述的一种G6PD缺乏症的基因检测膜条,其特征在于:所述基因检测膜条由以下方法制备而成:
a. 用打印机在基底膜条上打印位点阵列;
b. 用EDAC溶液浸泡打印后的膜条:将浸泡后的膜条置于水平摇床上轻摇浸泡30min,以活化膜条表面的羧基基团;
c. 分别用探针稀释液将33条探针稀释至5μmol/L;
d. 将探针点加在膜条相应位点上,探针上的氨基与膜条表面的羧基发生交联反应;
e. 待膜条干燥后,用0.1mol/L的NaOH溶液浸泡膜条5分钟,以封闭膜条表面未反应的羧基;
f. 纯水洗涤膜条,干燥后即可。
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