[发明专利]德保苏铁芽诱导培养基的制备方法

说明书

技术领域

 本发明属于德保苏铁的培养技术，更具体涉及德保苏铁芽诱导培养基的制备方法。

背景技术

德保苏铁为苏铁科苏铁属植物，中国特有种。零星分布于广西西南部的靖西、德保、那坡、百色以及云南东南部的富宁等县市，资源量极少，被列为国家一级重点保护野生植物。

发明内容

技术方案

本发明涉及一种德保苏铁的培养基的制备方法，其特征在于：所述方法的具体步骤包括：芽诱导培养基的制备方法。

     本发明涉及一种德保苏铁的芽诱导培养基的制备方法，其特征在于：所述方法的具体步骤包括： 

     1)取材方法：选取当年籽粒饱满的德保苏铁种子，采摘后，消毒处理，将消毒过的鸡蛋清与德保苏铁种子混合均匀；

     2) 芽诱导培养：诱导培养：在无菌的条件下取饱满的胚，去掉培乳，将消毒过的鸡蛋清与去掉培乳的胚混合均匀；直接接种于所述芽诱导培养基上；100～150 g的芽诱导培养基接种2-5个去掉培乳的胚；

所述诱导培养的培养条件：培养室温度为25±2℃，光照时间10～16 h/d，光照强度1000～2000 Lx；诱导培养的时间3～8天；

     3) 芽诱导培养基的配制：在MS基本培养基中添加：黄芪多糖10-20 mg/L，党参多糖10-20 mg/L，所述芽诱导培养基，灭菌冷却后形成固体厚度为1.2～1.6 cm。 

具体实施方式

实施例1

1)取材方法：取当年籽粒饱满的德保苏铁种子共400粒，平均分为4组供实施例1-4使用，采摘后，消毒处理，将消毒过的鸡蛋清与德保苏铁种子混合均匀；

     2) 芽诱导培养：诱导培养：在无菌的条件下取饱满的胚，去掉培乳，将消毒过的鸡蛋清与去掉培乳的胚混合均匀；直接接种于所述芽诱导培养基上；150 g的芽诱导培养基接种5个去掉培乳的胚；

所述诱导培养的培养条件：培养室温度为25℃，光照时间10 h/d，光照强度1500 Lx；诱导培养的时间5天；

     3) 芽诱导培养基的配制：在MS基本培养基中添加：黄芪多糖10 mg/L，党参多糖10 mg/L，所述芽诱导培养基，灭菌冷却后形成固体厚度为1.4 cm。 

100个胚，共有76个胚诱导出芽，每个胚的平均诱导芽数为6个。

实施例2

1)取材方法：选取当年籽粒饱满的德保苏铁种子，采摘后，消毒处理，将消毒过的鸡蛋清与德保苏铁种子混合均匀；

        2) 芽诱导培养：诱导培养：在无菌的条件下取饱满的胚，去掉培乳，将消毒过的鸡蛋清与去掉培乳的胚混合均匀；直接接种于所述芽诱导培养基上；100 g的芽诱导培养基接种3个去掉培乳的胚；

所述诱导培养的培养条件：培养室温度为23℃，光照时间12 h/d，光照强度1800 Lx；诱导培养的时间5天；

       3) 芽诱导培养基的配制：在MS基本培养基中添加：黄芪多糖20 mg/L，党参多糖20 mg/L，所述芽诱导培养基，灭菌冷却后形成固体厚度为1.5 cm。 

100个胚，共有79个胚诱导出芽，每个胚的平均诱导芽数为8个。

实施例3

1)取材方法：取当年籽粒饱满的德保苏铁种子，采摘后，消毒处理；

     2) 芽诱导培养：诱导培养：在无菌的条件下取饱满的胚，直接接种于所述芽诱导培养基上；150 g的芽诱导培养基接种5个胚；

所述诱导培养的培养条件：培养室温度为25℃，光照时间10 h/d，光照强度1500 Lx；诱导培养的时间18天；

     3) 芽诱导培养基的配制：在MS基本培养基中添加：NAA(0.1 mg/L)+IAA(1.0 mg/L)+AgCL(8.5 g/L)，所述芽诱导培养基，灭菌冷却后形成固体厚度为1.4 cm。 

100个胚，共有14个胚诱导出芽，每个胚的平均诱导芽数为2个。

实施例4

1)取材方法：选取当年籽粒饱满的德保苏铁种子，采摘后，消毒处理，将消毒过的鸡蛋清与德保苏铁种子混合均匀；

     2) 芽诱导培养：诱导培养：在无菌的条件下取饱满的胚，直接接种于所述芽诱导培养基上；150 g的芽诱导培养基接种5个胚；

所述诱导培养的培养条件：培养室温度为25℃，光照时间10 h/d，光照强度1500 Lx；诱导培养的时间18天；