[发明专利]一种从雪松松针中制备食品褐变抑制剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从雪松松针中制备食品褐变抑制剂的方法，属于食品褐变抑制剂及其制备领域。 

背景技术

食品在加工贮存过程中出现颜色变褐、红、蓝、黄、绿及其他颜色的现象称为褐变。有些食品，例如果蔬中的多酚类物质与空气中的氧气在多酚氧化酶(PPO)的催化下反应生邻醌类化合物，随后，邻醌继续将多酚类物质氧化成羟基醌，羟基醌最终聚合为黑褐色的黑色素物质（Chang TS.An updated review of tyrosinase inhibitors[J].International journal of molecular sciences,2009,10（6）：2440-2475）。食品褐变包括蔬菜、水果和鱼、虾等甲壳类，如果合成了较多的黑色素，这就会严重地影响产品的质量，从而导致其产品质量的下降。同时，食品褐变也是当前我国农、水产品保鲜面临的一个需迫切解决的课题。食品褐变包括多酚氧化酶，例如酪氨酸酶等导致的酶促褐变与非酶促褐变（孙芝杨,钱建亚.果蔬酶促褐变机理及酶促褐变抑制研究进展[J].中国食物与营养,2007,(3)：22～24）。因此，从天然产物中寻找具有酪氨酸酶抑制活性和抗氧化活性的食品褐变抑制剂成为人们的研究热点。 

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种从雪松松针中制备食品褐变抑制剂的方法，其特点是从雪松松针中制备食品褐变抑制剂的抑制效果好，褐变抑制剂的有效组分2R,3R-二氢杨梅素对酪氨酸酶显示了较强的抑制活性，并显示了较好的抗氧化活性，同时2R,3R-二氢杨梅素对鲜切苹果的褐变有较强的延缓作用。 

本发明的目的由以下技术实施实现，其中所述原料份数除特殊说明外，均为重量份数。 

从雪松松针中制备食品褐变抑制剂的方法包括以下步骤： 

（1）将干燥雪松松针粉碎，平均粒度为300～500μm，按料液比1g∶10～20mL加入正己烷，在室温下震荡12～24h，过滤、分离正己烷萃取液； 

（2）将上述脱脂松针，按料液比1g∶10～30mL加入浓度为50～70wt%的甲醇作为提取剂，在室温下震荡24～48h，分离上清液，并将上清液浓缩干燥后获得甲醇浸膏，得率 为18～22%； 

（3）将上述甲醇浸膏悬浮于浓度为50wt%的甲醇20～30mL，上大孔吸附树脂Diaion HP-20层析柱，用甲醇-水梯度洗脱，浓度为0wt%、15wt%、30wt%、40wt%、60wt%、100wt%甲醇，洗脱流速为3～5mL/min，优选流速为3mL/min； 

（4）收集上述40wt%甲醇洗脱液，浓缩干燥后得到样品，用制备高效液相色谱继续分离纯化；液相色谱的分离条件如下：ODS-3色谱柱（φ20×250mm，5μm）；流速，5mL/min；柱温25℃；检测波长，280nm；梯度洗脱液，甲醇和水的体积比为1∶1；收集16.5min的色谱峰，减压除去溶剂，获得褐变抑制剂。 

褐变抑制剂的有效组分为2R,3R-二氢杨梅素，其结构式如下 

所述从雪松松针中制备的食品褐变抑制剂用于食品抗褐变。 

结构表征与性能测试： 

1、采用质谱对2R,3R-二氢杨梅素的结构测试得到了证实，如图1所示。ESI HR-MS(negative),m/z319.0461[M-H]-。 

2、采用¹H-NMR对2R,3R-二氢杨梅素的结构测试得到了证实，如图2所示。 

3、采用¹³C-NMR对2R,3R-二氢杨梅素的结构测试得到了证实，如图3所示。 

4、2R,3R-二氢杨梅素对苹果模型褐变现象的抑制测试方法及测试结果如下： 

待测溶液包括水（阴性对照）、0.5%抗坏血酸水溶液、0.05%2R,3R-二氢杨梅素水溶液和0.5%抗坏血酸+0.05%2R,3R-二氢杨梅素水溶液。测试结果见图4-6所示。 

本发明具有如下优点： 

本发明提供了从雪松松针中制备食品褐变抑制剂的抑制效果好，2R,3R-二氢杨梅素对于酪氨酸酶显示了较强的抑制活性以及较好的抗氧化活性，同时2R,3R-二氢杨梅素对鲜切苹果的褐变有较强的延缓作用；并具有工艺简单、操作方便等优点。 

附图说明

图1：2R,3R-二氢杨梅素化合物的质谱图 

如图1所示，结果表明该化合物的分子量为320。 

图2：2R,3R-二氢杨梅素化合物的氢谱图