[发明专利]检测心脏标记物的试纸条及制备方法和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及临床免疫学检测技术领域，特别是涉及一种检测心脏标记物的胶体金试纸条及其制备方法和检测方法。

背景技术

POCT（point-of-care testing，即时检验），指在病人旁边进行的临床检测，通常不一定是临床检验师来进行，是在采样现场即刻进行分析，省去标本在实验室检验时的复杂处理程序，快速得到检验结果的一类新方法。当今社会，随着医学的诊断和治疗水平的不断提高及实际工作的需要，以及医学模式的转变和医疗体制的改革，从而带动了POCT的发展，而且随着免疫反应和分子生物技术的引进，POCT在检验医学中的新领域受到人们的关注和重视，是随着医学模式和人们对健康理念的转变发展起来的，POCT的使用更为便捷，检测和应用的范围更为广泛。

心脏标志物检测是POCT检测的一个重要领域，急性心血管疾病如AMI（急性心肌梗死）是大多数心血管疾病的最主要死亡病因，如何快速识别出早期急性心肌梗死患者并及时治疗是提高其存活率的关键，如果无法在短时间内确诊胸痛病人是否患有致命的AMI的话，那么那些非AMI的病人不但要无端的担惊受怕，而且每天要承担额外的大额医药费和住院费，不仅如此，有些AMI患者因诊断不及时得不到及时治疗而延误病情甚至死亡，因此，临床快速诊断对于患者抢救和治疗以及控制病情发展十分重要，对于无典型胸痛和心电图改变的AMI患者，检测血清心肌标志物是诊断AMI的必要依据，其中的心肌蛋白质类标志物如心肌肌钙蛋白I（cTnI）对心肌损伤有高度的特异性和敏感性，已成为临床诊断心肌损伤的确定标志物，尤其对于AMI的临床诊断具有重要意义。肌红蛋白（MyO）是早期诊断AMI最重要的指标，肌酸激酶同功酶（CK～MB）是临床医师诊断AMI最信赖的心肌标志物，心肌肌钙蛋白I是心肌损伤检测的金标准，B钠尿肽（BNP）是全新的充血性心力衰竭诊断的标志物，可协助诊断充血性心力衰竭，判断病情的严重程度，预防以及指导治疗等。目前上述指标都已可以用POCT方法测定，这对于心肌损伤性疾病特别是心肌梗死的早期诊断、及时采取有效的治疗措施具有非常重要的意义。

尽管心脏标志物检测具有一系列的优点，但目前POCT产品中仍然存在问题，例如灵敏度和重复性欠佳，不能正确反映患者病情；检测结果误差大即变异系数（CV）太大，同一批产品可能出现不同的检测结果。因此无法保证每一批产品，每一个测试单元质量都一样、结果都一致，这一问题也直接制约着心脏标志物POCT产品的使用和发展。

发明内容

（一）要解决的技术问题

本发明要解决的技术问题是如何提供一种灵敏度高、稳定性好和可信度高的用于检测心脏标记物的胶体金试纸条。

（二）技术方案

为了解决上述技术问题，本发明提供一种检测心脏标记物的试纸条，其包括底板和依次交错设置在底板上的样品垫、胶体金垫、包被膜和吸水垫，所述胶体金垫与包被膜之间设有缓冲液垫，且缓冲液垫分别和胶体金垫、包被膜接触。

其中，所述胶体金垫和缓冲液垫可以为一体式结构垫，在所述一体式结构垫的一侧喷涂有胶体金标记的抗心脏标志物抗体溶液作为所述胶体金垫，其另一侧作为所述缓冲液垫。

其中，所述胶体金垫和缓冲液垫均由玻璃纤维或聚酯纤维材料制成。

其中，所述胶体金垫上喷涂有颗粒直径为20nm-100nm的胶体金标记的单克隆抗体或多克隆抗体蛋白。

其中，所述包被膜上间隔设有一条抗心脏标志物抗体检测带和一条兔抗鼠抗体质控带，所述抗心脏标志物抗体的量为1～50μg。

其中，所述缓冲液垫与包被膜上的检测带之间的距离不小于0.5cm。

其中，所述检测带涂覆有单克隆抗体或多克隆抗体蛋白。

其中，所述质控带涂覆有能与所述胶体金标记的单克隆抗体或多克隆抗体蛋白相结合的抗抗体。

其中，所述包被膜由硝酸纤维素膜制成。

本发明还提供一种如上述任一项技术方案所述的检测心脏标记物的试纸条的制备方法，包括如下步骤：

（1）制备胶体金垫：将牛血清白蛋白或聚乙二醇封闭的胶体金标记的抗心脏标志物抗体溶液喷洒于玻璃纤维膜或聚酯纤维膜的一端，烘干备用；另一端作为缓冲液垫；

（2）制备包被膜：将抗心脏标志物抗体稀释液和抗抗体稀释液喷涂于硝酸纤维素膜上，烘干备用；

（3）将样品垫用样品溶液处理后烘干备用；

（4）选取一种吸水性强的材质制作成吸水垫；

（5）在所述底板上依次相互交错地粘上制备的样品垫、胶体金垫、缓冲液垫、包被膜以及吸水垫，然后在其上表面覆盖透明塑料密封膜得到所述试纸条。