[发明专利]新型死亡受体激动性多价抗体及其在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明提供了一类新型抗人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的受体DR（death receptor）胞外区的抗体。该类死亡受体激动性多价抗体可以识别DR4、DR5的相同或相似的表位，形成多价抗体，诱导表达DR4和/或DR5的肿瘤细胞发生凋亡。通过人的p53结构域连接，形成四价抗体，该四价抗体包含重链可变区和轻链可变区，重链可变区氨基酸序如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区氨基酸序如SEQ ID NO.2所示。该类激动性抗体诱导同时表达DR4、DR5的肿瘤凋亡的能力明显强于只针对DR4或DR5的激动性抗体。本发明还提供了该类死亡受体激动性抗体在制备抗肿瘤药物方面的应用。

技术领域

本发明涉及一类新型死亡受体的激动性多价抗体，该类抗体可以诱导表达DR4和/或DR5的肿瘤细胞发生凋亡，可用于制备抗肿瘤药物。

背景技术

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（Tumor necrosis factor-relatedapoptosis inducing ligand, TRAIL）是willy等于1995年发现的TNF超家族新成员。实验证实TRAIL对几乎所有系统恶性肿瘤的大部分细胞系均有杀伤作用，而对正常组织无杀伤作用（Nat Med, 1999, 5: 157-63）, 因此以 TRAIL 受体为靶点的肿瘤治疗已成为研究的热点。

TRAIL的诱导肿瘤细胞凋亡的生物学效应主要是通与细胞膜上的相应受体：DR4(Death receptor-4)、DR5 (Death receptor-5)结合而产生的。当TRAIL与DR4或DR5结合后，DR4与DR5可以形成同源/异源三聚体，通过其含有的胞内死亡结构域(death domain,DD)传导凋亡信息至胞质内, 激活caspase系统最终引起细胞凋亡（Science. 1997;276:111–113. Immunity. 2000;12:611–620. Cell Signal. 2004;16:139–144.）。

有些研究小组研发出死亡受体激动性抗体，这些抗体与DR4或DR5特异性结合后,模拟TRAIL的作用, 诱导肿瘤细胞凋亡（Nat Med. 2001;7:954–960. J Clin Oncol 25:1390–1395.）。由于抗体的分子量较大，在体内半衰期比TRAILL长，因此研制死亡受体的激动性抗体代替TRAIL, 成为开发药物的主要方向。

理论上，激活DR4和DR5的激动性抗体具有以下优点：对于同时表达DR4和DR5的肿瘤，其诱导肿瘤细胞凋亡的能力明显强于只针对DR4或DR5的激动性抗体; 对于只表达DR4或DR5的肿瘤，也只需一种抗体药物，便于临床应用。然而目前虽然已有多个实验室报道获得了DR4或 DR5的激动性抗体，但是没有实验室报道制备出具有同时激活DR4和DR5能力的激动性抗体。这个现象说明按照传统思路，制备同时激活DR4和DR5的激动性抗体可行性不强。

发明内容

本发明目的在于提供一类新型的能同时激活DR4和DR5的死亡受体激动性多价抗体，及其在制备抗肿瘤药物方面的应用。

新型死亡受体激动性多价抗体，识别DR4、DR5的相同或相似的表位，形成多价抗体，可以诱导表达DR4 和/或DR5的肿瘤细胞发生凋亡。

新型死亡受体激动性多价抗体，识别DR4、DR5的相同或相似的表位，通过基因工程的方法形成多价抗体，从而可以诱导表达DR4和/或DR5的肿瘤细胞发生凋亡。

新型死亡受体激动性多价抗体，识别DR4、DR5的相同或相似的表位，通过人的p53结构域连接，形成四价抗体，从而可以同时诱导表达DR4和/或DR5的肿瘤细胞发生凋亡，该四价抗体包含重链可变区和轻链可变区，重链可变区氨基酸序如SEQ ID NO.1所示，轻链可变区氨基酸序如SEQ ID NO.2所示。

上述的新型死亡受体激动性多价抗体在制备抗肿瘤药物中的应用。