[发明专利]细胞微粒子-siRNA复合物的制备及其在艾滋病治疗中的应用

说明书

分案说明

本申请是申请人于2010年12月9日申请的名称为“细胞微粒子-siRNA复合物的制备及其在艾滋病治疗中的应用”，申请号为201010601506.X的中国发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明属于艾滋病治疗药物领域，具体采用RNA干扰的方法进行艾滋病的治疗。提供高效、特异性的siRNA及作为运送载体的细胞微粒子。两者的复合物可以作为药物进行艾滋病及HIV感染者的治疗。

现有技术

艾滋病

艾滋病的医学名称为″获得性免疫缺陷综合症″(英文缩写AIDS)，是一种病死率很高的严重传染病。它是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的，以T细胞免疫功能缺陷为主的一种综合免疫缺陷病。它把人体免疫系统中最重要的T4淋巴细胞作为攻击目标，破坏T4淋巴细胞，从而使整个人体免疫系统遭到破坏。当人体处于正常状态时，体内免疫系统可以有效抵抗各种病毒的袭击。一旦艾滋病病毒侵入人体体内，这种良好的防御体系便会土崩瓦解，各种病毒乘机通过血液、破损伤口长驱直入。此外，人体内一些像癌细胞之类的不正常细胞，也会迅速生长、繁殖，最终发展成各类癌瘤。通俗地讲，艾滋病病毒是通过破坏人的免疫系统和机体抵抗能力，最终导致人体丧失对各种疾病的抵抗能力而导致死亡的。

HIV是带有包膜的RNA逆转录病毒，在分类上属逆转录病毒科中的慢病毒亚科，目前已发现HIV-1型和HIV-2型。HIV呈球型或卵型，直径100-150nm，系双层结构。病毒的核心位于病毒体的中央或偏心，核心由RNA及核衣壳蛋白质(P7、P9)、逆转录酶(Reverse Transcriptase，RT)、核糖核酸酶H(Ribo H)及整合酶(INT)所组成；核心外为病毒衣壳，呈20面体立体对称，由蛋白质(P17/P18、P24/P25)组成。病毒最外层为膜蛋白。包膜上有72个刺突(Spike)，含糖蛋白gp120，并在双层脂质中有gP41蛋白。

艾滋病病毒侵入人体后直接侵犯人体免疫系统，攻击和杀伤的是人体免疫系统中最重要、最具有进攻性的T4淋巴细胞，使机体一开始就处于丧失防御能力的地位。艾滋病病毒一旦进入人体，就寄生于T4淋巴细胞内最核心的部位，并与细胞核的遗传物质DNA整合为一体，并利用T4淋巴细胞进行自身遗传物质的复制。病毒的繁殖和复制使免疫细胞遭到破坏和毁灭，并放出更多的病毒。新增殖病毒再感染更多的细胞。就这样，病毒一代代地复制、繁殖，免疫细胞不断死亡。

艾滋病通过性、血液和母婴三种接触方式传播，是一种严重危害健康的传染性疾病。艾滋病从发现至今不过几十年，但它在全球所引起的广泛流行，已使3000多万人受到感染，1000多万人失去了生命，世界上每天有万余人新感染上艾滋病病毒。

艾滋病治疗现状

目前，抗艾滋病病毒治疗的药物包括：核苷类逆转录酶抑制剂、非核苷类逆转录酶抑制剂、蛋白酶抑制剂等。

核苷类逆转录酶抑制剂的作用是通过阻断病毒RNA基因的逆转录，即阻断病毒的双股DNA的形成，使病毒失去复制的模板。这些药物首先进入被感染的细胞，然后磷酸化形成具有活性的三磷酸化合物。AZT和d4T是病毒核酸复制天然底物脱氧胸苷dT的类似物；ddC和3TC是脱氧胞苷dC的类似物，这些双脱氧核苷三磷酸盐是HIV-1逆转录酶竞争抑制剂，当他们插入生长的DNA链时，可导致未成熟的DNA链终结，病毒DNA合成受阻并进而导致病毒复制受到抑制。

非核苷类逆转录酶抑制剂是一组与核苷无关，化学结构完全不同的特异性抑制HIV-1逆转录酶的化合物，它们不是HIV-1逆转录酶底物竞争抑制剂，而是通过与酶活性点附近的p66疏水区结合而抑制逆转录酶。

蛋白酶抑制剂是基于肽类的化合物，它们或竞争性抑制蛋白酶活性，或作为互补蛋白酶活性点的抑制剂，能抑制蛋白酶的功能，使新产生的病毒不能成熟。

目前流行的高效抗逆转录病毒疗法，俗称“鸡尾酒疗法”，是采用蛋白酶抑制剂加两种核苷类逆转录酶抑制剂的方法治疗感染者和病人的方法。此种药物具有较强的抗病毒作用，经使用后可在血浆中检测不到病毒，并可长期维持这一疗效。另外，它还可以使被艾滋病病毒破坏的人类免疫功能获得恢复或部分恢复。但是这一疗法有其本身的局限性，包括治疗费用高昂及副作用明显等缺点。

干扰核糖核酸(small interfering RNA，siRNA)