[发明专利]一种车前草离体快速繁殖的方法

权利要求书

1.一种车前草离体快速繁殖的方法，包括如下步骤：

1）愈伤组织诱导培养：将经灭菌消毒的车前草叶片切去叶脉和叶缘，切成小块，接种到愈伤组织诱导培养基上，常规培养至形成愈伤组织和不定芽；

2）生根培养：挑选步骤1）中芽长达2-3厘米的不定芽，将其从愈伤组织上切下，其余愈伤组织和不定芽继续愈伤组织诱导培养，切下的不定芽接种到生根培养基上，常规培养至长出白色的根，获得无菌车前草种苗。

2.如权利要求1所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述灭菌消毒的具体方法为：采摘无病虫害的车前草叶片，流水冲洗，在超净工作台上用酒精浸泡30s，再转入0.1%的升汞溶液中浸泡8min，用无菌水冲洗3-5次。

3.如权利要求1所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述小块优选0.8mm×0.8mm的小块。

4.如权利要求1所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基为以MS培养基为基本培养基，所含蔗糖浓度为10～50g/L、萘乙酸浓度为0.05～0.5mg/L、6-苄氨基嘌呤浓度为1.0～4.0mg/L的培养基。

5.如权利要求4所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养基为以MS培养基为基本培养基，所含蔗糖浓度为30g/L、萘乙酸浓度为0.1mg/L、6-苄氨基嘌呤浓度为1.0mg/L的培养基，或以MS培养基为基本培养基，所含蔗糖浓度为30g/L、萘乙酸浓度为0.1mg/L、6-苄氨基嘌呤浓度为2.0mg/L的培养基。

6.如权利要求1所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述生根培养基为以MS培养基为基本培养基，所含蔗糖浓度为30g/L、萘乙酸浓度为0.1mg/L、6-苄氨基嘌呤浓度为2.0mg/L的培养基。

7.如权利要求1所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述常规培养的培养条件为pH值6.0，培养温度25℃，光照周期12小时/天，光照强度为2000lx。

8.如权利要求1所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述愈伤组织诱导培养的时间为28-32天。

9.如权利要求1所述的车前草离体快速繁殖的方法，其特征在于，所述生根培养的时间为14-16天。

10.权利要求1-9任一项所述的车前草离体快速繁殖的方法在车前草繁育中的应用。