[发明专利]一种离子液体双水相萃取锁阳中黄酮和皂苷的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物有效成分的分离纯化领域，具体涉及一种离子液体双水相萃取锁阳中黄酮和皂苷的方法。

技术背景

锁阳为锁阳科锁阳属寄生植物锁阳的干燥肉质茎,常寄生于蒺藜科植物白刺，多生长于干旱与含碱的沙地,主产于内蒙古、宁夏、新疆、甘肃、青海等西北地区。锁阳味甘、性温，具有补肾、助阳、益精、润肠养筋之效用，中医用于治疗阳痿、遗精、不孕、腰膝酸软、肠燥便秘等。锁阳中含有机酸、黄酮类、酚类、甾体类、三萜类、鞣质、糖苷等多种化学成分，其主要成分为黄酮和皂苷；黄酮类成分具有提高机体免疫力、清除自由基的生物活性；皂苷具有抗菌、解热、镇静、抗癌等多种生物活性。研究锁阳中黄酮和皂苷的分离提取技术，对于开发以锁阳为原料的具有提高机体免疫力、清除自由基活性、抗菌、抗癌的保健食品和中药新药具有重要意义。中国专利CN102258549A公开了一种锁阳黄酮的提取方法，采用乙醇溶剂对锁阳进行多次提取、利用大孔吸附树脂对黄酮类化合物进行分离的溶剂提取法，最终提取出锁阳中的黄酮。但是利用溶剂提取法对锁阳中黄酮进行分离提取，不仅复杂、费时，提取得到的黄酮量也不高。而生物物质的分离纯化领域中经常用到的双水相萃取技术，虽然条件温和、容易放大、可连续操作，但是，其使用的双水相萃取体系是由与水互溶的有机溶剂和盐构成，这种双水相萃取体系和传统的有机溶剂萃取一样，存在着溶剂易挥发、环境污染大等缺点，同时，其选择性和专一性不高，不能同时提取锁阳中的黄酮和皂苷，这种单一提取造成了资源的极大浪费。

发明内容

本发明的目的是提供一种方法简单、易操作、分相快、萃取率高、不需要挥发性有机溶剂、环境污染小、萃取系统的萃取液可循环利用、节省资源、具有较高的选择性和专一性、可同时提取锁阳中的黄酮和皂苷、有效避免单一提取造成的资源浪费、提高锁阳中黄酮和皂苷的提取率、提高锁阳的综合利用率、降低锁阳的深加工成本的离子液体双水相萃取锁阳中黄酮和皂苷的方法。

本发明的离子液体双水相萃取锁阳中黄酮和皂苷的方法，按照下列步骤进行：

（1）锁阳前处理：将锁阳粉碎成粉末，得锁阳粉末；

（2）超声粗提：向所述锁阳粉末中加入乙醇溶液，进行超声处理，然后过滤，得锁阳粗提液；

（3）双水相萃取：取所述锁阳粗提液，浓缩，然后加入离子液体和盐，形成离子液体/盐双水相体系，调节pH为3-7，混和均匀，静置分层，上层为含有大量锁阳中黄酮和皂苷的离子液体相；

（4）反萃取：取步骤（3）得到的上相液体，并加入乙酸乙酯，混合均匀，静置分层，分为乙酸乙酯相和离子液体相；

（5）减压蒸馏、真空干燥：取步骤（4）得到的乙酸乙酯相，对其进行减压浓缩和真空干燥，得锁阳中黄酮和皂苷；

（6）回收离子液体：取步骤（4）得到的离子液体相，先对其进行冰浴，然后进行过滤，得离子液体和盐。

本发明的离子液体双水相萃取锁阳中黄酮和皂苷的方法，步骤（3）中，还需要加入氯化钠，所述氯化钠的质量分数为0%-2%。

在离子液体双水相中，氯化钠的加入使相间界面张力及电位差发生了变化，改变了黄酮和皂苷在两相中分配，可提高锁阳中黄酮和皂苷的提取率。

所述离子液体包括但不限于[Bmim]Cl、[Hmim]Cl、[Omim]Cl、[Dmim]Cl、[Bmim]Br、[Bmim]BF₄、[BPy]BF₄、[Bmim]NO₃中的一种或多种；

所述盐包括但不限于磷酸盐、硫酸盐、碳酸盐、硝酸盐中的一种或多种。

本发明的离子液体双水相萃取锁阳中黄酮和皂苷的方法，所述步骤（3）中，所述离子液体为[Bmim]Cl，所述盐为磷酸盐。

所述磷酸盐包括但不限于K₃PO₄、KH₂PO₄、K₂HPO₄、Na₂HPO₄、NaH₂PO₄中的一种或多种。

本发明的离子液体双水相萃取锁阳中黄酮和皂苷的方法，所述步骤（3）中，所述磷酸盐为K₂HPO₄。