[发明专利]一株猪鼻支原体菌株、疫苗组合物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及一株新的猪鼻支原体菌株、疫苗组合物，以及其制备方法和应用，属于兽用疫苗领域。

背景技术

猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis，Mhr)是小猪上呼吸道中的常见寄生病原（Ross and Young于1993年检测），在猪群中检出率高，单独并不致病。Switzer于1953、1954、1955年先后分离到该支原体，并对其正式命名为猪鼻支原体（Mhr）。猪鼻支原体（Mhr）的感染主要通过呼吸道传播，通常是由母猪或大猪传给小猪。和猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae，Mhp）一样，猪鼻支原体能够粘附到呼吸道的纤毛上皮细胞，破坏纤毛屏障造成其他细菌继发感染引起猪肺炎、多发性浆膜炎、关节炎、咽鼓管炎、耳炎、结膜炎等。目前对该病原的预防还未有疫苗产品上市，加之不同地方分离的菌株致病性差异明显，筛选合适的疫苗株变得极其困难。

猪喘气病又称猪支原体肺炎或猪地方流行性肺炎（SEP），是由猪肺炎支原体引起的一种接触性慢性呼吸道传染病，普遍存在于世界各地。患病猪主要表现为咳嗽和气喘，生长迟缓，饲料转化率低，体温基本正常。解剖时以肺部病变为主，尤以两肺心叶、尖叶、膈叶和中间叶出现“胰样变”和“肉样变”为其特征。本病发病率高，死亡率低，主要危害是使猪群生长受阻和饲料转化率大幅下降，并能引起继发感染，是造成养猪经济损失最重要的疾病之一。在国内养殖场中猪肺炎支原体、猪鼻支原体往往混合感染，某些猪鼻支原体菌株会促进猪地方流行性肺炎的发生。此外，有研究者在一起免疫猪肺炎支原体疫苗后感染猪地方流行性肺炎的病理解剖中仅分离到了猪鼻支原体，通过进一步的人工感染试验证实，意外地发现猪鼻支原体可以单独引发猪地方流行性肺炎。

临床发现，猪鼻支原体的感染率在呈逐年增加趋势。为此，急需开发一种猪鼻支原体疫苗，用来预防猪鼻支原体病原，尤其是预防猪鼻支原体引起的猪地方流行性肺炎。

发明内容

为解决现有技术的不足，本发明提供了一种支原体属猪鼻支原体分离株，名称为支原体属猪鼻支原体LYH株（Mycoplasma hyorhinis strain LYH），其保藏编号为CCTCC No.V201334，保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：中国武汉武汉大学，保藏日期：2013年8月20日。

本发明中所用术语“支原体属猪鼻支原体”也简称为“猪鼻支原体”。

类似的，本发明中所用术语“支原体属猪鼻支原体LYH株”也简称为“猪鼻支原体LYH株”。

本发明还提供一种疫苗组合物，所述疫苗组合物包括免疫量的猪鼻支原体抗原以及药学上可接受的载体。所述药学上可接受的载体包括防腐剂、稀释剂、佐剂。

优选地，所述猪鼻支原体抗原为含有猪鼻支原体LYH株或其培养物的减毒全菌抗原、灭活全菌抗原、亚单位抗原、合成肽抗原或基因工程抗原。所述疫苗组合物为含有猪鼻支原体LYH株或其培养物的减毒活疫苗、灭活疫苗、亚单位疫苗、合成肽疫苗或基因工程疫苗。

优选地，所述疫苗组合物包含佐剂，所述佐剂为氢氧化铝胶、矿物油、卡波姆、Gel01、蜂胶、ISA206、ISA760VG。更优选地，所述佐剂为卡波姆、Gel01、ISA206、ISA760VG。进一步优选地，所述佐剂为卡波姆、Gel01。最优选地，所述佐剂为Gel01。

优选地，所述佐剂在疫苗组合物中为10～60%（v/v）。

优选地，在所述疫苗组合物中，所述猪鼻支原体含量为10⁸～10¹⁰CCU/ml。更优选地，在所述疫苗组合物中，所述猪鼻支原体含量为4.5×10⁸CCU/ml。

本发明所用的术语“培养物”是猪鼻支原体的不同代次传代培养物，本领域技术人员知晓不同代次之间其基因序列仅可能会发生微小的变异。

本发明所用的术语“疫苗”或“疫苗组合物”可互换使用，其是指包含至少一种在动物中诱导免疫应答的免疫原性组合物的药物组合物。

本发明所用的术语“活疫苗”指的是以毒力已经减弱但仍可在宿主体内或细胞上复制的病原体制备的疫苗。本发明所用的术语“减毒”用于指以使病原丧失致病性、但保持免疫原性的方式对基因进行突变来人工降低病原体毒性。通常，通过UV辐射、化学处理或体外连续高阶继代培养实现减毒。人工的基因改变，例如将已知序列中的特定核苷酸缺失以使毒力减弱。