[发明专利]一种黑僵菌的培养方法

说明书

本发明公开了一种黑僵菌的培养方法，其包括如下步骤：（1）培养容器灭菌，待用；香蕉去皮,高压灭菌后冷却，加到培养容器上待用；（2）接种：将黑僵菌孢子或菌体接种到灭菌后的香蕉上；（3）培养：培养温度控制在20～30℃，培养室相对湿度控制在95%以上,培养至菌丝体满布培养基表面；（4）获取：待培养基表面菌丝全面复盖变黑，培养室的相对湿度缓慢降低,至培养基里外都长满了乳黄色的孢子时进行干燥处理。采用本发明的方法，培养周期可以缩短至5天，而产品的含孢子量可达到1000亿/g，比现有技术提高10倍以上。本发明可采用次品香蕉，其价格低廉，成本低。

技术领域

本发明涉及微生物培养领域，具体的，涉及一种黑僵菌的培养方法。

背景技术

黑僵菌(Metarhizium anisopliae)为一种可以杀死昆虫的真菌，其应用范围有鳞翅目昆虫：斜纹夜蛾(黑肚虫)、甜菜夜蛾(管仔虫)、小菜蛾(吊丝虫)、玉米穗虫(青虫)等。鞘翅目昆虫：金龟子(鸡母虫)、叩头虫(金针虫)等。直翅目昆虫：蝗虫等。黑僵菌分生孢子被害虫摄食后，沿肠道进入中肠，在中肠中释放出毒素，使中肠细胞内的线粒体和内质网结构改变，细胞核萎缩而死亡。受黑僵菌感染死亡的幼虫之后体表满布分生孢子，借由分生孢子的传播于田间行成重复有效的感染源。

现有的黑僵菌培养方法为谷壳、麦麸等固体培养基进行培养，孢子液接种，7天后开始收孢子，其孢子量一般在100亿/克。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的黑僵菌的培养方法。

本发明提供的技术方案如下：

一种黑僵菌的培养方法，其特征在于：采用香蕉去皮之后作为培养基，将黑僵菌孢子或菌体接种到培养基上进行培养。

较佳地，前述的一种黑僵菌的培养方法，包括如下步骤：

（1）培养容器灭菌，待用；香蕉去皮,高压灭菌后冷却，加到培养容器上待用；

（2）接种：将黑僵菌孢子或菌体接种到灭菌后的香蕉上；

（3）培养：培养温度控制在20～30℃，培养室相对湿度控制在95%以上,培养至菌丝体满布培养基表面；

（4）获取：待培养基表面菌丝全面复盖变黑，培养室的相对湿度缓慢降低,至培养基里外都长满了乳黄色的孢子时进行干燥处理。

较佳地，步骤（1）的所述的培养容器为开放式的培养容器，例如可以采用敞口容器，如盘状、碗状、长方体等各种形状。

较佳地，步骤（1）的香蕉培养基在培养容器上的厚度为1-5cm。更佳地为3-4cm。

较佳地，步骤（2）的接种比例为，按重量比，接种的孢子液体与培养基之间的液固比为0.5-5：10。

较佳地，步骤（3）培养室温度控制在20～24℃；培养室相对湿度在24h内控制在95%以上,24～48h内控制在100%,可通过每天喷无菌水来调节培养室的相对湿度，2d后停止喷水。

较佳地，步骤（4）中，培养室的温度提高到25℃-26℃,培养室的相对湿度缓慢降低,培养至第5d,培养基里外都长满了乳黄色的孢子这时可进行干燥处理。

采用本发明的方法，培养周期可以缩短至5天，而产品的含孢子量可达到1000亿/g，比现有技术提高10倍以上。本发明可采用次品香蕉，其价格低廉，成本低。

具体实施方式

实施例1

香蕉去皮作为固体培养基。固体培养基的灭菌高压灭菌压力为1.2kg/cm²,保压60min,冷却后待用常压灭菌，利用蒸气消毒柜消毒，100℃保温2h,冷却待用。