[发明专利]用于培养猪孤雌激活胚及体外受精胚胎的体外培养液无效
申请号: | 201310700566.0 | 申请日: | 2013-12-18 |
公开(公告)号: | CN103710299A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 高建明;史雅然;赵菊;李冬冬;张志刚;徐捷;张超 | 申请(专利权)人: | 北京农学院 |
主分类号: | C12N5/073 | 分类号: | C12N5/073 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 102206 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 培养 猪孤雌 激活 体外受精 胚胎 体外 培养液 | ||
1.一种猪体外胚胎培养液,其特征在于:所述猪体外胚胎培养液是在NCSU-23胚胎培养液中加入终浓度为0.05~5.00μg/mL的川芎嗪后得到的培养液。
2.根据权利要求1所述的猪体外胚胎培养液,其特征在于:所述NCSU-23胚胎培养液为将NCSU-23基础培养液、D-葡萄糖、L-谷氨酰胺、牛磺酸、亚牛磺酸、L-半胱氨酸、青霉素、硫酸链霉素,以及牛血清白蛋白按照1L:1.1g:0.146g:0.876g:0.546g:0.069g:100000IU:70000IU:4g的配比混合而成。
3.根据权利要求2所述的猪体外胚胎培养液,其特征在于:所述NCSU-23基础培养液的溶剂为水,溶质及其浓度如下:NaCl 6.354g/L、KCl 0.356g/L、K2HPO4 0.162g/L、CaCl2·2H2O 0.250g/L、MgSO4·7H2O 0.293g/L、NaHCO3 2.106g/L、青霉素108333IU/L、硫酸链霉素50000IU/L。
4.一种培养猪体外胚胎的方法,是将猪体外胚胎置于权利要求1-3中任一所述的猪体外胚胎培养液中进行培养。
5.根据权利要求1-3中任一所述的猪体外胚胎培养液,或权利要求4所述的方法,其特征在于:所述猪体外胚胎为猪孤雌激活胚或猪体外受精胚胎。
6.根据权利要求1-5中任一所述的猪体外胚胎培养液或方法,其特征在于:当所述猪体外胚胎为猪孤雌激活胚时,所述猪体外胚胎培养液中所述川芎嗪的终浓度为0.05~0.50μg/mL;当所述猪体外胚胎为猪体外受精胚胎时,所述猪体外胚胎培养液中所述川芎嗪的终浓度为5.00μg/mL。
7.根据权利要求4-6中任一所述的方法,其特征在于:将所述猪体外胚胎置于所述猪体外胚胎培养液中培养为:每个50μL的所述猪体外胚胎培养液的液滴中培养15~20枚所述猪体外胚胎。
8.根据权利要求4-7中任一所述的方法,其特征在于:将所述猪体外胚胎置于所述猪体外胚胎培养液中培养的条件为:39℃,5%CO2,100%饱和湿度。
9.根据权利要求4-8中任一所述的方法,其特征在于:将所述猪体外胚胎置于所述猪体外胚胎培养液中培养,间隔48h换液一次。
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