[发明专利]人工诱导的MLE转座子试剂盒及其应用在审
申请号: | 201310698907.5 | 申请日: | 2013-12-18 |
公开(公告)号: | CN103710342A | 公开(公告)日: | 2014-04-09 |
发明(设计)人: | 周明兵;汤定钦;杨萍;郑丽娜 | 申请(专利权)人: | 浙江农林大学 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/82 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 311300 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人工 诱导 mle 座子 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种MLE转座子试剂盒,其特征在于包括含有核苷酸序列为SEQIDNO.2的miniPpMLE21的载体以及含有核苷酸序列为SEQIDNO.3的转座酶序列的载体。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,其中含有核苷酸序列为SEQIDNO.2的miniPpMLE21的载体是将miniPpMLE21转座子构建到pBINm-gfp5-ER载体上,获得转座子供体载体pBINm-gfp5-ER-miniPpMLE21。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,所述的含有核苷酸序列为SEQIDNO.3的转座酶序列的载体是转座酶序列构建到pCAMBIA1301载体上。
4.上述MLE转座子试剂盒在诱变转基因植物中的应用。
5.根据权利要求1所述的应用,所述的应用包括如下步骤:
(1)将miniPpMLE21转座子构建到pBINm-gfp5-ER载体上,获得转座子供体载体pBINm-gfp5-ER-miniPpMLE21,转化拟南芥,通过卡那霉素筛选阳性植株;
(2)转座酶序列(SEQIDNO.3)构建到pCAMBIA1301载体,获得转座酶表达载体pCAMBIA1301-Tp,转化携带有PpMLE21转座子的拟南芥,通过卡那霉素和潮霉素共同筛选阳性植株;
(3)通过提高培养环境的温度,诱导转座酶表达和转座发生。
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