[发明专利]一种堇菜总黄酮的制备新工艺

说明书

技术领域：

本发明属于天然有机化学领域，涉及一种堇菜总黄酮的分离纯化工艺，特别是涉及一种利用大孔吸附树脂耦合硅胶柱层析分离纯化堇菜总黄酮的工艺。

背景技术：

堇菜(学名：Viola verecunda A.Gray)为堇菜科堇菜属的植物。生长于海拔100米至2,200米的地区，常生于灌丛、田野、山坡草丛、杂木林林缘、湿草地及宅旁。全草供药用，清热解毒，凉血消肿。用于疔疮肿毒，痈疽发背，丹毒，毒蛇咬伤.堇菜性寒味微苦，有清热解毒的功效。主治黄疸、痢疾、乳腺炎、目赤肿痛、咽炎；外敷治跌打损伤、痈肿、毒蛇咬伤。

堇菜所含黄酮甙类及有机酸对金色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌都有较强的抑菌作用。所富集微量元素，对人体内多种酶的活性有作用，对核酸蛋白的合成、免疫过程、细胞繁殖都有直接或间接的作用，可促进上皮细胞修复，使细胞分裂增加，T细胞增高，活性增加，从而对生物体的免疫功能起调节作用，通过酶系统发挥对机体代谢的调节和控制。所含锌可抗病毒，并能刺激抗毒素的合成，提高对传染病的抵抗力，是其：“清热解毒”、“治疽疗毒”的基础。近年来，人们发现堇菜中含有大量的黄酮，由于其原料堇菜来源较广，从中提取总黄酮已取得了可喜进展，名称为“一种天山堇菜总黄酮提取纯化工艺”的专利申请中便公开了将堇菜用热水提取法分离纯化总黄酮的制备方法。上述专利文献中的总黄酮提取工艺主要是热水提取、硅胶柱层析等步骤制备而成，工艺路线简单，但最后的总黄酮纯度不高，实际应用效果远远不如大孔吸附树脂耦合硅胶柱层析分离纯化的效果。

发明内容

本发明目的在于提供一种堇菜总黄酮的制备新工艺；本发明目的还在于提供一种方便快捷、原料来源丰富、提取效率高、分离纯化效果明显、提取纯度高的利用连续逆流提取联合溶剂萃取富集纯化堇菜总黄酮的生产工艺。

本发明目的是通过如下技术方案实现的。

一种堇菜总黄酮的制备新工艺，其步骤如下：

1)将堇菜清洗后加入连续逆流提取罐用丙酮水溶液回流提取；

2)将经1)处理的提取液过滤，得黄酮粗提液：

3)将所得黄酮粗提液浓缩，得黄酮粗浓缩液；

4)将所得黄酮粗浓缩液泵入连续萃取灌组物料罐，萃取溶剂为乙酸乙酯，经由萃取塔得黄酮乙酸乙酯萃取液；

5)将黄酮乙酸乙酯萃取液浓缩，得总黄酮浓缩膏；

6)将总黄酮浓缩膏拌硅胶，并将拌好的混合物至于硅胶柱上方，经乙酸乙酯和石油醚混合液洗脱，得洗脱液；

7)将洗脱液回收溶剂后浓缩干燥得堇菜总黄酮半成品；

8)将堇菜总黄酮半成品用丙酮水溶液溶解，过滤，回收丙酮，浓缩，放置析出晶体，抽滤得堇菜总黄酮成品。

所述步骤1)中，堇菜清洗后进行丙酮水溶液回流提取。提取溶剂为50％～85％的丙酮水溶液。

所述步骤1)中，提取的设备为逆流提取生产线，包括提升机、进料传送、逆流提取罐组主机1、掏料器1、挤汁机1、逆流提取罐组主机2、掏料器2、挤汁机2、出料传送、中间泵、出液泵、暂存罐、换热器、进液阀门等。粉碎过筛后原料由提升机加料口处匀速加入，提取液自流至暂储罐经由出液泵连续泵出。

所述步骤1)中，逆流生产线参数为，提升机频率15～30Hz，主机1频率18～20Hz，挤汁机1频率45～50Hz，主机2频率20～22Hz，挤汁机2频率40～45Hz，出液泵流量0.5～2T/h，进料100～400kg/h。

所述步骤4)中，萃取步骤由连续萃取罐组完成，包括溶剂罐、物料罐、重液罐、轻液罐、残液罐、萃取塔、流量计、物料泵等。

所述步骤4)中，连续萃取罐组参数为，溶剂泵流量1～3L/min，物料泵流量0.4～1L/min。

所述步骤6)中，硅胶层析步骤采用湿法装柱，保留液面，将浓缩膏按重量1：1拌活化后硅胶，并将拌好的混合物置于硅胶柱上方，洗脱液为乙酸乙酯：石油醚体积比为50～85：15的乙酸乙酯与石油醚混合物，洗脱流速每分钟0.1ml/g硅胶，洗脱体积为5BV。硅胶活化条件为，110℃30min。

所述步骤8)中，堇菜总黄酮的半成品用9～16倍量50％丙酮水溶液40℃热溶。浓缩密度为d＝1.03～1.05。