[发明专利]一株甲萘醌-7（MK-7）高产菌及其应用

权利要求书

1.一株甲萘醌-7高产菌株，为解淀粉芽孢杆菌亚种（Bacillus amyloliquefaciens）Y-2，于2013年10月23日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：M2013493。

2.根据权利要求1所述的甲萘醌-7高产菌株，其特征在于所述菌株从纳豆中分离得到。

3.根据权利要求1所述的甲萘醌-7高产菌株，其特征在于所述菌株平板单菌落为白色或微黄色，圆形；幼龄菌落半透明，24h后逐渐发白，菌落粘稠，拉长丝；培养48h，菌落直径可达到5mm以上，菌落边缘不光滑呈裂叶状，中央突起，或呈火山口状；结晶紫染色后镜检，其个体微小，长2-3μm，宽0.6-0.9μm，其中有芽孢的短杆菌占多数，芽孢呈圆形或椭圆状，不明显膨大，芽孢中生或次中生，多为两端均匀染色，静止液体培养时，在液体表面生长。

4.根据权利要求1所述的甲萘醌-7高产菌株，其特征在于所述菌株的16SrRNA序列如Seq ID NO.1所示。

5.一种应用权利要求1所述菌株生产甲萘醌-7的方法，其特征在于包括如下步骤：

1）将活化的菌种，用接种环挑接到50mL种子培养基中，37℃，100r/min培养10h；

2）将培养好的种子液按5%的接种量接到发酵培养基中，在温度为37℃，转速为100r/min的条件下培养2h，然后静置培养6天。

6.根据权利要求5所述的生产甲萘醌-7的方法，其特征在于所述种子培养基为：玉米粉液化液1L，豆粕粉20g/L，大豆蛋白胨15g/L，酵母膏15g/L、K₂HPO₄0.1g/L，NaCl2.5g/L，pH为7.0-7.2,0.1MPa压力下灭菌20min。

7.根据权利要求5所述的生产甲萘醌-7的方法，其特征在于所述发酵培养基为：玉米粉液化液1L，豆粕粉40g/L，大豆蛋白胨15g/L，酵母膏15g/L、K₂HPO₄0.1g/L，NaCl2.5g/L，pH为7.0-7.2,0.07MPa压力下灭菌20min。

8.根据权利要求6或7所述的生产甲萘醌-7的方法其特征在于所述玉米粉液化液是将工业玉米粉按照30%的比例（w/v）加水混匀，然后沸水浴进行糊化，再按照0.1%的比例加入高温淀粉酶沸水浴液化20min，之后用4层纱布过滤得到上清，再用水补充至原体积，即可得到所需要的玉米粉液化液，其中还原糖含量为60g/L左右。