[发明专利]一种用于诱导表达锌指核酸酶的载体及其应用有效

专利信息
申请号: 201310692299.7 申请日: 2013-12-17
公开(公告)号: CN103757037A 公开(公告)日: 2014-04-30
发明(设计)人: 侯健;麻富强;安晓荣 申请(专利权)人: 中国农业大学
主分类号: C12N15/63 分类号: C12N15/63;C12N15/66;C12N9/22;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21
代理公司: 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人: 关畅
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 一种 用于 诱导 表达 核酸酶 载体 及其 应用
【权利要求书】:

1.用于诱导表达作用于靶基因的锌指核酸酶环形载体,含有大肠杆菌复制起始区、氨苄青霉素抗性基因,以及表达盒1、表达盒2、表达盒3和表达盒4;

所述表达盒1从上游到下游依次包括如下元件:PCMV IE、Puror和SV40polyA;所述表达盒2从上游到下游依次包括如下元件:PCMV、rtTA-Advanced和SV40polyA;所述表达盒3从上游到下游依次包括如下元件:TREmod、PminCMV、DNA片段1和SV40polyA;所述表达盒4从上游到下游依次包括如下元件:TREmod、PminCMV、DNA片段2和SV40polyA;

所述DNA片段1和所述DNA片段2满足如下条件:所述DNA片段1编码的蛋白和所述DNA片段2编码的蛋白均含有能够与所述靶基因特异性结合的锌指结构域,以及能够切割所述靶基因的Fol kⅠ结构域。

2.根据权利要求1所述的环形载体,其特征在于:所述大肠杆菌复制起始区的序列为序列表中序列1的第8632-9231位;所述氨苄青霉素抗性基因的序列为序列表中序列1的第10323-9393位;和/或

在所述表达盒1中,所述PCMV IE的序列如序列表中序列1的第4196-4697位所示;所述Puror的序列如序列表中序列1的第4810-5406位所示;所述SV40polyA的序列如序列表中序列1的第5673-5723位所示;和/或

在所述表达盒2中,所述PCMV的序列如序列表中序列1的第8083-7502位所示;所述rtTA-Advanced的序列如序列表中序列1的第7394-6648位所示;所述SV40polyA的序列如序列表中序列1的第6625-6192位所示;和/或

在所述表达盒3中,所述TREmod的序列如序列表中序列1的第1979-1730位所示;所述PminCMV的序列如序列表中序列1的第1727-1659位所示;所述SV40polyA的序列如序列表中序列1的第458-265位所示;和/或

在所述表达盒4中,所述TREmod的序列如序列表中序列1的第1730-1979位所示;所述PminCMV的序列如序列表中序列1的第1985-2044位所示;所述SV40polyA的序列如序列表中序列1的第3377-3577位所示。

3.根据权利要求1或2所述的环形载体,其特征在于:所述DNA片段1的序列如序列表中序列2所示;所述DNA片段2的序列如序列表中序列3所示。

4.根据权利要求1-3中任一所述的环形载体,其特征在于:所述表达盒1的核苷酸序列为序列表中序列1的第4196-5723位;和/或

所述表达盒2的核苷酸序列为序列表中序列1的第8083-6192位;和/或

所述表达盒3的核苷酸序列为序列表中序列1的第1979-265位;和/或

所述表达盒4的核苷酸序列为序列表中序列1的第1730-3577位。

5.根据权利要求1-4中任一所述的环形载体,其特征在于:所述环形载体的核苷酸序列为序列表中序列1。

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