[发明专利]一种伊维菌素化学发光酶联免疫快速检测试剂盒

权利要求书

1.一种伊维菌素的化学发光酶联免疫检测试剂盒，包括盒体，设在盒体内的酶标板和设在盒体内试剂；所述酶标板的各孔包被有包被抗原，其中包被抗原由伊维菌素的代谢物与卵清蛋白偶联制成；所述试剂包括：伊维菌素的单克隆抗体、酶标二抗即辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、伊维菌素系列标准溶液、浓缩磷酸盐缓冲液、浓缩洗涤液、发光液。

2.如权利要求1所述的伊维菌素的化学发光酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述酶标板为不透明的聚苯乙烯8孔×12条的96孔化学发光酶标板。

3.如权利要求1所述的伊维菌素的化学发光酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述包被抗原浓度为5μg/ml。

4.如权利要求1所述的伊维菌素的化学发光酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述伊维菌素单克隆抗体的工作浓度为1:15000。

5.如权利要求1所述的伊维菌素的化学发光酶联免疫检测试剂盒，其特征在于：所述伊维菌素的单克隆抗体是由伊维菌素的代谢物与分子量范围是6.7KDa~6.8 KDa的牛血清蛋白偶合制成的偶联物作为免疫原免疫小鼠制备得到。

6.一种利用权利要求1所述的伊维菌素的化学发光酶联免疫检测试剂盒检测残余伊维菌素的方法，，使用伊维菌素系列标准溶液浓度分别为：0.1ng/mL（0标准）、0.5ng/mL、 0.8ng/mL 、lng/mL、5ng/mL、10ng/mL，其特征在于，包括以下步骤：

1）加样：向酶标板中加入50μL/孔的伊维菌素系列标准浓度溶液或样品溶液，然后加入伊维菌素抗体工作液50μL/孔，室温（25℃)恒温孵育2.5h；

2）洗涤：倾出孔中液体，向酶标板中加入200μL/孔的洗涤液，静置5min后拍干，重复三次；

3）加酶标二抗：每孔加入酶标二抗工作液100μL，室温恒温孵育1.5h;

4）洗涤：倾出孔中液体，向酶标板中加入280μL/孔的洗涤液，静置5min后拍干，重复三次；

5）加发光液：每孔加入发光液l00μL；

6）检测：用化学发光免疫分析仪测定每孔的发光强度；

7）结果判定：以所测得的伊维菌素系列标准浓度溶液对应的孔的发光值，除以第一个标准（0标准）的发光值再乘以100，得到抑制率B/B0%，以抑制率为纵坐标，各伊维菌素系列标准浓度溶液浓度的对数为横坐标作标准曲线，根据样品溶液所对应的孔的发光值和所得标准曲线，计算得到样品溶液的浓度。