[发明专利]一种总黄酮和绿原酸含量的同时检测方法

权利要求书

1.一种总黄酮和绿原酸含量的同时检测方法，该方法包括下述步骤：

第1步采用与制作标准曲线相同的方式对待测样品进行氯化钴显色处理；

第2步测定经氯化钴显色反应后的待测样品溶液分别在256nm、330nm波长处的吸光度I₂₅₆、I₃₃₀；

第3步计算样品溶液中绿原酸在330nm波长处已扣除黄酮干扰的吸光度以及黄酮在256nm波长处已扣除绿原酸干扰的吸光度即：

I330L=AA-BI330-A×BA-BI256,I256R=AA-BI256-1A-BI330]]>

其中，A为同一浓度的标准溶液在256nm和330nm波长处绿原酸吸光度的比值关系，B为同一浓度的标准溶液在256nm和330nm波长处芦丁吸光度的比值关系；

第4步利用绿原酸和芦丁对照品的标准曲线，分别计算得到绿原酸和黄酮的含量。

2.根据权利要求1所述的总黄酮和绿原酸含量的同时检测方法，其特征在于，该方法用于金银花及其提取液，绿原酸固体产品，或者其它类似植物草药中的黄酮与绿原酸含量的测定。

3.根据权利要求1所述的总黄酮和绿原酸含量的同时检测方法，其特征在于，制作绿原酸标准曲线和芦丁的标准曲线的过程为：

绿原酸标准曲线：精密称取一定量的绿原酸对照品，用蒸馏水溶解并定容，即得到绿原酸对照品溶液；分别精确量取一定量绿原酸对照品溶液和氯化钴溶液，置于容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，即得到一组不同浓度的绿原酸标准溶液；另外以相同体积的氯化钴溶液经乙醇溶液定容的溶液为空白，依次取上述绿原酸标准溶液，分别测定绿原酸不同浓度的溶液在256nm波长和330nm波长处的吸光度；由所得数值确定在同一浓度的溶液中绿原酸在256nm波长和330nm波长处吸光度的比值关系为在330nm波长处，以溶液浓度(C_L)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制绿原酸标准曲线；

芦丁标准曲线：精密称取一定量的芦丁对照品，用蒸馏水溶解并定容，即得到芦丁对照品溶液；分别精确量取一定量芦丁对照品溶液和氯化钴溶液，置于容量瓶中，用乙醇溶液定容至刻度，即得到一组不同浓度的芦丁标准溶液；以相同体积的氯化钴溶液经乙醇溶液定容后的溶液为空白，依次取上述芦丁标准溶液，分别测定芦丁不同浓度的溶液在256nm波长和330nm波长处的吸光度；由所得数值确定在同一浓度的溶液中芦丁在256nm波长和330nm波长处吸光度的比值关系为在256nm波长处，以溶液浓度C_R为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制芦丁的标准曲线。

4.根据权利要求1所述的总黄酮和绿原酸含量的同时检测方法，其特征在于，所述采用的显色体系是浓度为0.05～0.25mol/L的氯化钴水溶液。

5.根据权利要求1所述的总黄酮和绿原酸含量的同时检测方法，其特征在于，A＝3.008，B＝0.812。